福氏志贺菌外输调节蛋白基因marA的原核表达载体构建及其鉴定
복씨지하균외수조절단백기인marA적원핵표체재체구건급기감정
Construction and expression of a prokaryotic expression vector encoding efflux pump regulated protein gene marA of Shigella flexneri
  • 万方数据
    中国动物检疫 중국동물검역
    CHINA ANMAL QUARANTINE
    2008年 11期 26-28 ,共3页

    魏小娟%张继瑜%王松泰%牛建荣%李剑勇%周旭正%吴培星%李金善

    위소연%장계유%왕송태%우건영%리검용%주욱정%오배성%리금선

    志贺菌%marA%原核表达 誌賀菌%marA%原覈錶達
    지하균%marA%원핵표체
    目的 构建志贺菌外输调节蛋白基因marA的原核表达载体并对其表达的蛋白进行鉴定.方法 采用PCR从志贺菌基因组DNA中扩增得到志贺菌外输调节蛋白基因marA,并将其定向克隆到原核表达载体pET-30a,构建原核表达重组质粒pET-30a-marA,重组子经限制性内切酶分析、PCR及测序鉴定后,转化宿主菌BL21,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印迹分析鉴定.结果 经鉴定证实原核表达载体pET-30a-marA构建成功,且在大肠杆菌BL21中获得了MarA与His的融合表达,且表达蛋白产物的分子质量大小与预期值一致,并可被特异性抗体所识别.结论 MarA在大肠杆菌中获得了高效的表达,为进一步研究其免疫学特性和功能奠定了基础.
    목적 구건지하균외수조절단백기인marA적원핵표체재체병대기표체적단백진행감정.방법 채용PCR종지하균기인조DNA중확증득도지하균외수조절단백기인marA,병장기정향극륭도원핵표체재체pET-30a,구건원핵표체중조질립pET-30a-marA,중조자경한제성내절매분석、PCR급측서감정후,전화숙주균BL21,IPTG유도표체,산물진행SDS-PAGE전영、면역인적분석감정.결과 경감정증실원핵표체재체pET-30a-marA구건성공,차재대장간균BL21중획득료MarA여His적융합표체,차표체단백산물적분자질량대소여예기치일치,병가피특이성항체소식별.결론 MarA재대장간균중획득료고효적표체,위진일보연구기면역학특성화공능전정료기출.
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