CAJ | 학술논문

背景:细胞质在细胞分化过程中起着决定作用,但目前的实验很难获得大量的、有活性的胞质体.目的:分析影响大鼠骨髓间质干细胞胞质体制备的因素,并观察胞质体活性,以期为细胞重组提供实验依据.设计、时间及地点:以细胞为观察对象的多因素设计实验,于20016-09/2007-01在南京医科大学基础医学院卫生部抗体技术重点实验室完成.材料:选用1月龄SD大鼠,用于分离骨髓间充质干细胞.方法:骨髓间质干细胞经分离培养、扩增后,用松胞素B、秋水仙碱结合离心术制备胞质体.主要观察指标:应用苏木精-伊红、Alexa-Flour(R)488anti-rat CD106及Bis-Benzimide染色进行形态学观察,计算胞质体纯度;应用Rhodamine123标记后用流式细胞仪检测胞质体中线粒体膜势能.结果:①胞质体纯度可达95%.80%的胞质体在一两个小时内恢复原来形态,但其生活力不会超过18 h.胞质体活性随时间延长而F降.②骨髓间质干细胞的胞质体制备与松弛素B、秋水仙碱剂量、离心速度、离心时间,特别是离心温度有关.结论:骨髓间质干细胞的胞质体制备可受多因素影响.当胞质体具有活性,具有有核细胞的一些行为特征时,可以进行细胞重组.
배경:세포질재세포분화과정중기착결정작용,단목전적실험흔난획득대량적、유활성적포질체.목적:분석영향대서골수간질간세포포질체제비적인소,병관찰포질체활성,이기위세포중조제공실험의거.설계、시간급지점:이세포위관찰대상적다인소설계실험,우20016-09/2007-01재남경의과대학기출의학원위생부항체기술중점실험실완성.재료:선용1월령SD대서,용우분리골수간충질간세포.방법:골수간질간세포경분리배양、확증후,용송포소B、추수선감결합리심술제비포질체.주요관찰지표:응용소목정-이홍、Alexa-Flour(R)488anti-rat CD106급Bis-Benzimide염색진행형태학관찰,계산포질체순도;응용Rhodamine123표기후용류식세포의검측포질체중선립체막세능.결과:①포질체순도가체95%.80%적포질체재일량개소시내회복원래형태,단기생활력불회초과18 h.포질체활성수시간연장이F강.②골수간질간세포적포질체제비여송이소B、추수선감제량、리심속도、리심시간,특별시리심온도유관.결론:골수간질간세포적포질체제비가수다인소영향.당포질체구유활성,구유유핵세포적일사행위특정시,가이진행세포중조.