上海畜牧兽医通讯
上海畜牧獸醫通訊
상해축목수의통신
SHANGHAI JOURNAL OF ANIMAL HUSBANDRY AND VETERINARY MEDICINE
2008年
2期
15-16
,共2页
慢病毒载体%转基因动物
慢病毒載體%轉基因動物
만병독재체%전기인동물
慢病毒载体作为基因治疗载体发展起来,现已用于转基因动物制备.本实验用磷酸钙沉淀法将转移质粒(pCCL-hCMV-eGFP)、包装质粒(pCMVΔR8.9)、包膜蛋白质粒(pMDG(VSV-G))三质粒共转染来源于人胚肾细胞系的包装细胞-293T,转染48 h后收集病毒上清,采用6孔板培养感染细胞,荧光显微镜计数EGFP阳性细胞法测定病毒滴度.载体滴度达2×107 TU/ml左右.
慢病毒載體作為基因治療載體髮展起來,現已用于轉基因動物製備.本實驗用燐痠鈣沉澱法將轉移質粒(pCCL-hCMV-eGFP)、包裝質粒(pCMVΔR8.9)、包膜蛋白質粒(pMDG(VSV-G))三質粒共轉染來源于人胚腎細胞繫的包裝細胞-293T,轉染48 h後收集病毒上清,採用6孔闆培養感染細胞,熒光顯微鏡計數EGFP暘性細胞法測定病毒滴度.載體滴度達2×107 TU/ml左右.
만병독재체작위기인치료재체발전기래,현이용우전기인동물제비.본실험용린산개침정법장전이질립(pCCL-hCMV-eGFP)、포장질립(pCMVΔR8.9)、포막단백질립(pMDG(VSV-G))삼질립공전염래원우인배신세포계적포장세포-293T,전염48 h후수집병독상청,채용6공판배양감염세포,형광현미경계수EGFP양성세포법측정병독적도.재체적도체2×107 TU/ml좌우.
