病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2008年
1期
34-40
,共7页
修文琼%中岛捷久%信泽枝里
脩文瓊%中島捷久%信澤枝裏
수문경%중도첩구%신택지리
禽流感病毒%H5N2%突变%血凝素
禽流感病毒%H5N2%突變%血凝素
금류감병독%H5N2%돌변%혈응소
以重组的蒙古鸭H5N2禽流感病毒A/Duck/Mongolia/54/01的血凝素HA蛋白的cDNA为模板,进行PCR随机突变,表达只有单个氨基酸突变的H5HA基因共计38个.根据红细胞吸附反应,分析这些突变HA的功能,仍然具有红细胞吸附活性的单个氨基酸突变的HA约占89%,说明H5HA单个氨基酸突变的容许率是相当高的.HA1区突变数目大约是HA2区的两倍.对失去红细胞吸附功能和某些仍然拥有红细胞吸附功能的HA及单个氨基酸突变的位置与结构的关系进行探讨.有两个位点氨基酸突变了两次,但都不影响红细胞吸附功能,对红细胞吸附功能的影响,似乎主要由位置决定,而不是取决于取代的氨基酸的种类.位点179位和122位的突变是不允许的;位点179位于H5N1的受体结合区域RBD内,122位位于A抗原决定簇区附近,推测在H5HA三维结构上,这两个位点位于HA分子的内部,维持着H5HA的结构.HA1Cys位点4和HA2Cys位点148的突变是不允许的.这两个Cys正好形成HA1和HA2连接的桥梁,对维持H5HA结构也是相当重要的.本实验中HA先后失去了三个糖基化位点,但并不影响吸附红细胞的功能.总之,通过实验分析以研究某些氨基酸改变的效果,寻找关键位点是否突变,可以作为评估H5N1野毒株大流行潜力的分子标志.
以重組的矇古鴨H5N2禽流感病毒A/Duck/Mongolia/54/01的血凝素HA蛋白的cDNA為模闆,進行PCR隨機突變,錶達隻有單箇氨基痠突變的H5HA基因共計38箇.根據紅細胞吸附反應,分析這些突變HA的功能,仍然具有紅細胞吸附活性的單箇氨基痠突變的HA約佔89%,說明H5HA單箇氨基痠突變的容許率是相噹高的.HA1區突變數目大約是HA2區的兩倍.對失去紅細胞吸附功能和某些仍然擁有紅細胞吸附功能的HA及單箇氨基痠突變的位置與結構的關繫進行探討.有兩箇位點氨基痠突變瞭兩次,但都不影響紅細胞吸附功能,對紅細胞吸附功能的影響,似乎主要由位置決定,而不是取決于取代的氨基痠的種類.位點179位和122位的突變是不允許的;位點179位于H5N1的受體結閤區域RBD內,122位位于A抗原決定簇區附近,推測在H5HA三維結構上,這兩箇位點位于HA分子的內部,維持著H5HA的結構.HA1Cys位點4和HA2Cys位點148的突變是不允許的.這兩箇Cys正好形成HA1和HA2連接的橋樑,對維持H5HA結構也是相噹重要的.本實驗中HA先後失去瞭三箇糖基化位點,但併不影響吸附紅細胞的功能.總之,通過實驗分析以研究某些氨基痠改變的效果,尋找關鍵位點是否突變,可以作為評估H5N1野毒株大流行潛力的分子標誌.
이중조적몽고압H5N2금류감병독A/Duck/Mongolia/54/01적혈응소HA단백적cDNA위모판,진행PCR수궤돌변,표체지유단개안기산돌변적H5HA기인공계38개.근거홍세포흡부반응,분석저사돌변HA적공능,잉연구유홍세포흡부활성적단개안기산돌변적HA약점89%,설명H5HA단개안기산돌변적용허솔시상당고적.HA1구돌변수목대약시HA2구적량배.대실거홍세포흡부공능화모사잉연옹유홍세포흡부공능적HA급단개안기산돌변적위치여결구적관계진행탐토.유량개위점안기산돌변료량차,단도불영향홍세포흡부공능,대홍세포흡부공능적영향,사호주요유위치결정,이불시취결우취대적안기산적충류.위점179위화122위적돌변시불윤허적;위점179위우H5N1적수체결합구역RBD내,122위위우A항원결정족구부근,추측재H5HA삼유결구상,저량개위점위우HA분자적내부,유지착H5HA적결구.HA1Cys위점4화HA2Cys위점148적돌변시불윤허적.저량개Cys정호형성HA1화HA2련접적교량,대유지H5HA결구야시상당중요적.본실험중HA선후실거료삼개당기화위점,단병불영향흡부홍세포적공능.총지,통과실험분석이연구모사안기산개변적효과,심조관건위점시부돌변,가이작위평고H5N1야독주대류행잠력적분자표지.
