生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
6期
909-911
,共3页
郏雁飞%胡安拉%汪运山%周芳%马晓丽%苏占涛
郟雁飛%鬍安拉%汪運山%週芳%馬曉麗%囌佔濤
겹안비%호안랍%왕운산%주방%마효려%소점도
甲胎蛋白%小干扰RNA%质粒%基因表达
甲胎蛋白%小榦擾RNA%質粒%基因錶達
갑태단백%소간우RNA%질립%기인표체
目的:构建特异性抑制甲胎蛋白(AFP)的小干扰RNA(siRNA)表达载体,为进一步研究AFP基因功能及AFP相关肿瘤的基因治疗奠定基础.方法:设计并合成AFP特异性的短链寡核苷酸,退火形成双链DNA片段,通过与RNAi-ReadypSIREN-DNR-DsRed-Express Donor Vector连接、转化大肠杆菌、扩增、纯化得到所需质粒,用琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列.结果:琼脂糖凝胶电泳证实纯化后的质粒大小约为6 740 bp,测序证实插入序列与合成的寡核苷酸序列完全符合.结论:构建了AFP特异性的siRNA表达质粒pSIREN-DNR-DsRed-Express Donor Vector-AFP.
目的:構建特異性抑製甲胎蛋白(AFP)的小榦擾RNA(siRNA)錶達載體,為進一步研究AFP基因功能及AFP相關腫瘤的基因治療奠定基礎.方法:設計併閤成AFP特異性的短鏈寡覈苷痠,退火形成雙鏈DNA片段,通過與RNAi-ReadypSIREN-DNR-DsRed-Express Donor Vector連接、轉化大腸桿菌、擴增、純化得到所需質粒,用瓊脂糖凝膠電泳及基因測序鑒定其分子量及插入片段的序列.結果:瓊脂糖凝膠電泳證實純化後的質粒大小約為6 740 bp,測序證實插入序列與閤成的寡覈苷痠序列完全符閤.結論:構建瞭AFP特異性的siRNA錶達質粒pSIREN-DNR-DsRed-Express Donor Vector-AFP.
목적:구건특이성억제갑태단백(AFP)적소간우RNA(siRNA)표체재체,위진일보연구AFP기인공능급AFP상관종류적기인치료전정기출.방법:설계병합성AFP특이성적단련과핵감산,퇴화형성쌍련DNA편단,통과여RNAi-ReadypSIREN-DNR-DsRed-Express Donor Vector련접、전화대장간균、확증、순화득도소수질립,용경지당응효전영급기인측서감정기분자량급삽입편단적서렬.결과:경지당응효전영증실순화후적질립대소약위6 740 bp,측서증실삽입서렬여합성적과핵감산서렬완전부합.결론:구건료AFP특이성적siRNA표체질립pSIREN-DNR-DsRed-Express Donor Vector-AFP.
