中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2007年
5期
824-830
,共7页
吴静%雷闽湘%谢小云%冯湘玲
吳靜%雷閩湘%謝小雲%馮湘玲
오정%뢰민상%사소운%풍상령
罗格列酮%一氧化氮%内皮型一氧化氮合酶%磷脂酰肌醇-3激酶%蛋白激酶B
囉格列酮%一氧化氮%內皮型一氧化氮閤酶%燐脂酰肌醇-3激酶%蛋白激酶B
라격렬동%일양화담%내피형일양화담합매%린지선기순-3격매%단백격매B
目的:观察罗格列酮对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)和蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)表达的影响,探讨罗格列酮改善内皮功能的信号转导机制.方法:首先观察罗格列酮对内皮细胞NO影响的时效和量效关系,然后加用eNOS和PKB信号阻断剂进行干预.用Griess重氮化反应法检测NO浓度,RT-PCR方法检测PI3K,PKB及eNOSmRNA的表达,Western免疫印迹方法检测PKB,eNOS总蛋白和PKB丝氨酸473(PKB-Ser473),eNOS丝氨酸1177(eNOS-Ser1177)的磷酸化表达.结果:罗格列酮呈剂量和时间依赖性地升高内皮细胞NO浓度,不同浓度的罗格列酮培养内皮细胞均能升高PI3K mRNA表达和PKB-Ser473,eNOS-Ser1177磷酸化,但对PKB和eNOS表达均无影响;eNOS阻断剂L-NAME能完全阻断罗格列酮培养的内皮细胞NO浓度的升高,PI3K阻断剂LY294002能阻断罗格列酮诱导的NO产生和PKB,eNOS的磷酸化.结论:罗格列酮能通过激活PI3K/PKB/eNOS信号通路而增强内皮细胞NO的浓度,改善内皮功能.
目的:觀察囉格列酮對人臍靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)一氧化氮(nitric oxide,NO)濃度和內皮型一氧化氮閤酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、燐脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)和蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)錶達的影響,探討囉格列酮改善內皮功能的信號轉導機製.方法:首先觀察囉格列酮對內皮細胞NO影響的時效和量效關繫,然後加用eNOS和PKB信號阻斷劑進行榦預.用Griess重氮化反應法檢測NO濃度,RT-PCR方法檢測PI3K,PKB及eNOSmRNA的錶達,Western免疫印跡方法檢測PKB,eNOS總蛋白和PKB絲氨痠473(PKB-Ser473),eNOS絲氨痠1177(eNOS-Ser1177)的燐痠化錶達.結果:囉格列酮呈劑量和時間依賴性地升高內皮細胞NO濃度,不同濃度的囉格列酮培養內皮細胞均能升高PI3K mRNA錶達和PKB-Ser473,eNOS-Ser1177燐痠化,但對PKB和eNOS錶達均無影響;eNOS阻斷劑L-NAME能完全阻斷囉格列酮培養的內皮細胞NO濃度的升高,PI3K阻斷劑LY294002能阻斷囉格列酮誘導的NO產生和PKB,eNOS的燐痠化.結論:囉格列酮能通過激活PI3K/PKB/eNOS信號通路而增彊內皮細胞NO的濃度,改善內皮功能.
목적:관찰라격렬동대인제정맥내피세포(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)일양화담(nitric oxide,NO)농도화내피형일양화담합매(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、린지선기순-3격매(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)화단백격매B(protein kinase B,PKB)표체적영향,탐토라격렬동개선내피공능적신호전도궤제.방법:수선관찰라격렬동대내피세포NO영향적시효화량효관계,연후가용eNOS화PKB신호조단제진행간예.용Griess중담화반응법검측NO농도,RT-PCR방법검측PI3K,PKB급eNOSmRNA적표체,Western면역인적방법검측PKB,eNOS총단백화PKB사안산473(PKB-Ser473),eNOS사안산1177(eNOS-Ser1177)적린산화표체.결과:라격렬동정제량화시간의뢰성지승고내피세포NO농도,불동농도적라격렬동배양내피세포균능승고PI3K mRNA표체화PKB-Ser473,eNOS-Ser1177린산화,단대PKB화eNOS표체균무영향;eNOS조단제L-NAME능완전조단라격렬동배양적내피세포NO농도적승고,PI3K조단제LY294002능조단라격렬동유도적NO산생화PKB,eNOS적린산화.결론:라격렬동능통과격활PI3K/PKB/eNOS신호통로이증강내피세포NO적농도,개선내피공능.
