中国感染与化疗杂志
中國感染與化療雜誌
중국감염여화료잡지
CHINESE JOURNAL OF INFECTION AND CHEMOTHERAPY
2007年
5期
362-367
,共6页
毛日成%张继明%尹有宽%秦艳丽%章婉琴%邬祥惠%翁心华
毛日成%張繼明%尹有寬%秦豔麗%章婉琴%鄔祥惠%翁心華
모일성%장계명%윤유관%진염려%장완금%오상혜%옹심화
乙型肝炎病毒%阿德福韦耐药%聚合酶链反应%限制性片段长度多态性
乙型肝炎病毒%阿德福韋耐藥%聚閤酶鏈反應%限製性片段長度多態性
을형간염병독%아덕복위내약%취합매련반응%한제성편단장도다태성
目的 建立一种简便、快速、实用的检测阿德福韦(ADV)耐药相关性HBV变异(rtA181V/T/S和rtN236T变异)的方法.方法 根据GenBank收录的HBV基因全序设计套式-PCR引物,使野毒株的PCR产物上游末端引入BglI 的酶切位点,使rt236变异株的PCR产物下游末端引入BseDI(SecI)的酶切位点,建立PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)方法.用此方法分别检测含rt181变异株、rt236变异株及野毒株质粒和3例ADV耐药慢性乙型肝炎患者血清标本.将变异株和野毒株配成不同比例,再用此方法检测,以了解该方法的敏感性.结果 本研究建立的PCR-RFLP方法可同时检测rt181变异和rt236变异;用此方法检测血清标本,结果与测序及克隆分析一致;此方法可检测出标本中10%的变异株.结论 应用PCR-RFLP方法可同时检测rtA181V/T/S和rtN236T变异,具有较高的敏感性,可用于ADV耐药变异的早期诊断.
目的 建立一種簡便、快速、實用的檢測阿德福韋(ADV)耐藥相關性HBV變異(rtA181V/T/S和rtN236T變異)的方法.方法 根據GenBank收錄的HBV基因全序設計套式-PCR引物,使野毒株的PCR產物上遊末耑引入BglI 的酶切位點,使rt236變異株的PCR產物下遊末耑引入BseDI(SecI)的酶切位點,建立PCR-限製性片段長度多態性(RFLP)方法.用此方法分彆檢測含rt181變異株、rt236變異株及野毒株質粒和3例ADV耐藥慢性乙型肝炎患者血清標本.將變異株和野毒株配成不同比例,再用此方法檢測,以瞭解該方法的敏感性.結果 本研究建立的PCR-RFLP方法可同時檢測rt181變異和rt236變異;用此方法檢測血清標本,結果與測序及剋隆分析一緻;此方法可檢測齣標本中10%的變異株.結論 應用PCR-RFLP方法可同時檢測rtA181V/T/S和rtN236T變異,具有較高的敏感性,可用于ADV耐藥變異的早期診斷.
목적 건립일충간편、쾌속、실용적검측아덕복위(ADV)내약상관성HBV변이(rtA181V/T/S화rtN236T변이)적방법.방법 근거GenBank수록적HBV기인전서설계투식-PCR인물,사야독주적PCR산물상유말단인입BglI 적매절위점,사rt236변이주적PCR산물하유말단인입BseDI(SecI)적매절위점,건립PCR-한제성편단장도다태성(RFLP)방법.용차방법분별검측함rt181변이주、rt236변이주급야독주질립화3례ADV내약만성을형간염환자혈청표본.장변이주화야독주배성불동비례,재용차방법검측,이료해해방법적민감성.결과 본연구건립적PCR-RFLP방법가동시검측rt181변이화rt236변이;용차방법검측혈청표본,결과여측서급극륭분석일치;차방법가검측출표본중10%적변이주.결론 응용PCR-RFLP방법가동시검측rtA181V/T/S화rtN236T변이,구유교고적민감성,가용우ADV내약변이적조기진단.
