CAJ | 학술논문

为了给伪狂犬病病毒(PrV)UL24蛋白的细胞定位和功能研究提供参考依据,据GenBank公布的PrV UL24基因序列(登录号NC006151)设计1对引物,以质粒pUL24-GFP为模板,用PCR方法扩增出部分缺失的基因片段mUL24 (modified UL24).将mUL24片段定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建融合表达载体pET-UL24.阳性质粒转化宿主菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导,重组蛋白 (His)6-UL24以包涵体的形式获得表达.用纯化后的pET-UL24融合蛋白免疫家兔,ELISA分析表明,在血清效价达到1∶2 560以上,Western-blot分析制备的抗体可以和pET-UL24表达产物发生反应,具有良好的免疫特异性.
위료급위광견병병독(PrV)UL24단백적세포정위화공능연구제공삼고의거,거GenBank공포적PrV UL24기인서렬(등록호NC006151)설계1대인물,이질립pUL24-GFP위모판,용PCR방법확증출부분결실적기인편단mUL24 (modified UL24).장mUL24편단정향극륭도원핵표체재체pET-32a(+)중,구건융합표체재체pET-UL24.양성질립전화숙주균E.coli BL21(DE3),경IPTG유도,중조단백 (His)6-UL24이포함체적형식획득표체.용순화후적pET-UL24융합단백면역가토,ELISA분석표명,재혈청효개체도1∶2 560이상,Western-blot분석제비적항체가이화pET-UL24표체산물발생반응,구유량호적면역특이성.