生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2007年
4期
662-666
,共5页
张林%华松%张涌%权富生%刘风军%廖列如%蒋永海
張林%華鬆%張湧%權富生%劉風軍%廖列如%蔣永海
장림%화송%장용%권부생%류풍군%료렬여%장영해
牛%山羊%核移植%胚胎
牛%山羊%覈移植%胚胎
우%산양%핵이식%배태
通过胞质内注射法将牛和山羊胎儿耳朵成纤维细胞分别注入去核牛卵母细胞中构建同种胚胎和异种胚胎.采用mCR2aa和InSOF分别培养,然后在msOF中按不同培养时间添加8mg/mL BSA或者10%FBS,培养前3d和培养3d后添加的补充物质及次序为:(1)BSA+FBS;(2)BSA+BSA;(3)FBS+BSA;(4)FBS+FBS.根据培养胚胎的卵裂率、8/16-cell发育率、囊胚发育率及囊胚细胞数筛选出最好的培养方法.结果:(1)mSOF中培养同种胚胎和异种胚胎的卵裂率,8/16-cell发育率以及囊胚发育率均明显高于在mCR2aa中的培养结果(P《0.05).(2)添加BSA+FBS组的mSOF培养胚胎的卵裂率、8/16-cell发育率、囊胚发育率和囊胚细胞数同种依次为79.8%±7.1%、49.7%±3.5%、21.5%±1.8%和115.2±4.3,异种依次为40.1%±6.3%、29.2%±2.0%、13.4%±2.1%和100.1±3.0,均明显高于其他培养组(P《0.05).结论:山羊-牛异种克隆胚胎可以用优化的牛胚胎培养体系进行培养.同种胚胎和异种胚胎的最佳培养方法均为前3d用mSOF+BSA培养液,3d后用mSOF+FBS培养液.
通過胞質內註射法將牛和山羊胎兒耳朵成纖維細胞分彆註入去覈牛卵母細胞中構建同種胚胎和異種胚胎.採用mCR2aa和InSOF分彆培養,然後在msOF中按不同培養時間添加8mg/mL BSA或者10%FBS,培養前3d和培養3d後添加的補充物質及次序為:(1)BSA+FBS;(2)BSA+BSA;(3)FBS+BSA;(4)FBS+FBS.根據培養胚胎的卵裂率、8/16-cell髮育率、囊胚髮育率及囊胚細胞數篩選齣最好的培養方法.結果:(1)mSOF中培養同種胚胎和異種胚胎的卵裂率,8/16-cell髮育率以及囊胚髮育率均明顯高于在mCR2aa中的培養結果(P《0.05).(2)添加BSA+FBS組的mSOF培養胚胎的卵裂率、8/16-cell髮育率、囊胚髮育率和囊胚細胞數同種依次為79.8%±7.1%、49.7%±3.5%、21.5%±1.8%和115.2±4.3,異種依次為40.1%±6.3%、29.2%±2.0%、13.4%±2.1%和100.1±3.0,均明顯高于其他培養組(P《0.05).結論:山羊-牛異種剋隆胚胎可以用優化的牛胚胎培養體繫進行培養.同種胚胎和異種胚胎的最佳培養方法均為前3d用mSOF+BSA培養液,3d後用mSOF+FBS培養液.
통과포질내주사법장우화산양태인이타성섬유세포분별주입거핵우란모세포중구건동충배태화이충배태.채용mCR2aa화InSOF분별배양,연후재msOF중안불동배양시간첨가8mg/mL BSA혹자10%FBS,배양전3d화배양3d후첨가적보충물질급차서위:(1)BSA+FBS;(2)BSA+BSA;(3)FBS+BSA;(4)FBS+FBS.근거배양배태적란렬솔、8/16-cell발육솔、낭배발육솔급낭배세포수사선출최호적배양방법.결과:(1)mSOF중배양동충배태화이충배태적란렬솔,8/16-cell발육솔이급낭배발육솔균명현고우재mCR2aa중적배양결과(P《0.05).(2)첨가BSA+FBS조적mSOF배양배태적란렬솔、8/16-cell발육솔、낭배발육솔화낭배세포수동충의차위79.8%±7.1%、49.7%±3.5%、21.5%±1.8%화115.2±4.3,이충의차위40.1%±6.3%、29.2%±2.0%、13.4%±2.1%화100.1±3.0,균명현고우기타배양조(P《0.05).결론:산양-우이충극륭배태가이용우화적우배태배양체계진행배양.동충배태화이충배태적최가배양방법균위전3d용mSOF+BSA배양액,3d후용mSOF+FBS배양액.
