中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2006年
3期
239-242
,共4页
丁勤学%刘进%胡潇华%李申%赵和平%黄凌云%何大澄
丁勤學%劉進%鬍瀟華%李申%趙和平%黃凌雲%何大澄
정근학%류진%호소화%리신%조화평%황릉운%하대징
双向电泳%上样方式%杯上样%蛋白质组%电泳图质量
雙嚮電泳%上樣方式%杯上樣%蛋白質組%電泳圖質量
쌍향전영%상양방식%배상양%단백질조%전영도질량
蛋白质组技术难点之一是如何获取尽可能多的细胞或组织的蛋白信息.双向电泳蛋白斑点数目直接反映了实验蛋白质组信息的完整性.除样品制备外,蛋白上样方式对双向电泳图谱的质量和完整性有直接的影响.实验论文从以下3个方面考察不同的蛋白上样方式对双向电泳图谱的影响;即:水化上样与杯上样;一次上样与重复上样;以及酸性端加样与碱性端上样.实验结果发现;蛋白上样量较大时,杯上样方式的图谱斑点数目较水化上样方式明显增多;样品蛋白浓度较高时,稀释多次上样明显优于一次性浓缩蛋白上样;蛋白裂解液(MCF-7乳腺癌细胞)在酸性端加样对偏碱性蛋白的分离未发现明显优势.相反,在等电聚焦伏小时(Vh)足够的前提下,碱性端加样对偏碱性端蛋白反而有利,表现为斑点数目较多,而且等电点方向拖尾减轻.实验结果对提高双向电泳的质量以及相关蛋白质组信息的完整性提供了有益的技术参考.
蛋白質組技術難點之一是如何穫取儘可能多的細胞或組織的蛋白信息.雙嚮電泳蛋白斑點數目直接反映瞭實驗蛋白質組信息的完整性.除樣品製備外,蛋白上樣方式對雙嚮電泳圖譜的質量和完整性有直接的影響.實驗論文從以下3箇方麵攷察不同的蛋白上樣方式對雙嚮電泳圖譜的影響;即:水化上樣與杯上樣;一次上樣與重複上樣;以及痠性耑加樣與堿性耑上樣.實驗結果髮現;蛋白上樣量較大時,杯上樣方式的圖譜斑點數目較水化上樣方式明顯增多;樣品蛋白濃度較高時,稀釋多次上樣明顯優于一次性濃縮蛋白上樣;蛋白裂解液(MCF-7乳腺癌細胞)在痠性耑加樣對偏堿性蛋白的分離未髮現明顯優勢.相反,在等電聚焦伏小時(Vh)足夠的前提下,堿性耑加樣對偏堿性耑蛋白反而有利,錶現為斑點數目較多,而且等電點方嚮拖尾減輕.實驗結果對提高雙嚮電泳的質量以及相關蛋白質組信息的完整性提供瞭有益的技術參攷.
단백질조기술난점지일시여하획취진가능다적세포혹조직적단백신식.쌍향전영단백반점수목직접반영료실험단백질조신식적완정성.제양품제비외,단백상양방식대쌍향전영도보적질량화완정성유직접적영향.실험논문종이하3개방면고찰불동적단백상양방식대쌍향전영도보적영향;즉:수화상양여배상양;일차상양여중복상양;이급산성단가양여감성단상양.실험결과발현;단백상양량교대시,배상양방식적도보반점수목교수화상양방식명현증다;양품단백농도교고시,희석다차상양명현우우일차성농축단백상양;단백렬해액(MCF-7유선암세포)재산성단가양대편감성단백적분리미발현명현우세.상반,재등전취초복소시(Vh)족구적전제하,감성단가양대편감성단단백반이유리,표현위반점수목교다,이차등전점방향타미감경.실험결과대제고쌍향전영적질량이급상관단백질조신식적완정성제공료유익적기술삼고.
