微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2006年
2期
243-248
,共6页
钱忠%王敬强%周传奇%马延和%刘斯奇
錢忠%王敬彊%週傳奇%馬延和%劉斯奇
전충%왕경강%주전기%마연화%류사기
腾冲嗜热厌氧菌%葡萄糖激酶%温度%糖酵解
騰遲嗜熱厭氧菌%葡萄糖激酶%溫度%糖酵解
등충기열염양균%포도당격매%온도%당효해
尽管在腾冲嗜热厌氧菌的基因组注释中缺乏葡萄糖激酶(Glucokinase,GLK)(EC 2.7.1.2),但是该菌的蛋白质表达谱分析表明,TTE0090可能是一种新型的葡萄糖激酶.利用体外克隆表达的方法,表达了重组TTE0090;此蛋白质不仅具备使葡萄糖磷酸化的催化活性,同时在高温下也能参与反应.采用Western blot和阴离子交换层析的 方法进一步检验了TTE0090在腾冲嗜热厌氧菌体内的蛋白质表达及其催化活性,发现体内TTE0090蛋白表达量随温度的升高而降低,而酶比活力却与生长温度呈正相关.这可能预示不同温度下腾冲嗜热厌氧菌中的糖酵解途径的催化通量是相对恒定的.实验数据均表明,TTE0090是存在于腾冲嗜热厌氧菌中的一种新型的葡萄糖激酶.TTE0090基因和其蛋白产物的研究工作,将进一步加深人们对嗜热菌的温度适应性以及它们的生存机理的了解.
儘管在騰遲嗜熱厭氧菌的基因組註釋中缺乏葡萄糖激酶(Glucokinase,GLK)(EC 2.7.1.2),但是該菌的蛋白質錶達譜分析錶明,TTE0090可能是一種新型的葡萄糖激酶.利用體外剋隆錶達的方法,錶達瞭重組TTE0090;此蛋白質不僅具備使葡萄糖燐痠化的催化活性,同時在高溫下也能參與反應.採用Western blot和陰離子交換層析的 方法進一步檢驗瞭TTE0090在騰遲嗜熱厭氧菌體內的蛋白質錶達及其催化活性,髮現體內TTE0090蛋白錶達量隨溫度的升高而降低,而酶比活力卻與生長溫度呈正相關.這可能預示不同溫度下騰遲嗜熱厭氧菌中的糖酵解途徑的催化通量是相對恆定的.實驗數據均錶明,TTE0090是存在于騰遲嗜熱厭氧菌中的一種新型的葡萄糖激酶.TTE0090基因和其蛋白產物的研究工作,將進一步加深人們對嗜熱菌的溫度適應性以及它們的生存機理的瞭解.
진관재등충기열염양균적기인조주석중결핍포도당격매(Glucokinase,GLK)(EC 2.7.1.2),단시해균적단백질표체보분석표명,TTE0090가능시일충신형적포도당격매.이용체외극륭표체적방법,표체료중조TTE0090;차단백질불부구비사포도당린산화적최화활성,동시재고온하야능삼여반응.채용Western blot화음리자교환층석적 방법진일보검험료TTE0090재등충기열염양균체내적단백질표체급기최화활성,발현체내TTE0090단백표체량수온도적승고이강저,이매비활력각여생장온도정정상관.저가능예시불동온도하등충기열염양균중적당효해도경적최화통량시상대항정적.실험수거균표명,TTE0090시존재우등충기열염양균중적일충신형적포도당격매.TTE0090기인화기단백산물적연구공작,장진일보가심인문대기열균적온도괄응성이급타문적생존궤리적료해.
