生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2006年
2期
311-315
,共5页
史琪琪%郝玉有%吴康%储炬%庄英萍%张嗣良
史琪琪%郝玉有%吳康%儲炬%莊英萍%張嗣良
사기기%학옥유%오강%저거%장영평%장사량
诱导相温度%重组人复合α干扰素%聚合体%毕赤酵母
誘導相溫度%重組人複閤α榦擾素%聚閤體%畢赤酵母
유도상온도%중조인복합α간우소%취합체%필적효모
研究了Pichiapastoris表达重组人复合α干扰素(cIFN)时诱导期温度对cIFN形成聚合体的影响.在5L罐上考察毕赤酵母在不同温度(30、25、20℃)下诱导时菌体生长和cIFN表达的差异,发现毕赤酵母在20℃下菌体生长不受影响,总蛋白表达量有所降低,相当于30℃发酵时胞外总蛋白的67.8%.但是通过非还原性电泳、Native-PAGE及Western blotting分析发现较高温度(30℃)诱导表达时,分泌到胞外的cIFN容易形成聚合体,单体含量很少.诱导相控制温度为20℃时,明显降低了cIFN聚合体的形成,cIFN单体量为570mg/L,发酵上清液抗病毒活性为1.05×109IU/mL.与控制诱导相温度为30℃相比,cIFN单体量提高了7.2倍,发酵上清液中单位体积的cIFN抗病毒活性提高了38.7倍.
研究瞭Pichiapastoris錶達重組人複閤α榦擾素(cIFN)時誘導期溫度對cIFN形成聚閤體的影響.在5L罐上攷察畢赤酵母在不同溫度(30、25、20℃)下誘導時菌體生長和cIFN錶達的差異,髮現畢赤酵母在20℃下菌體生長不受影響,總蛋白錶達量有所降低,相噹于30℃髮酵時胞外總蛋白的67.8%.但是通過非還原性電泳、Native-PAGE及Western blotting分析髮現較高溫度(30℃)誘導錶達時,分泌到胞外的cIFN容易形成聚閤體,單體含量很少.誘導相控製溫度為20℃時,明顯降低瞭cIFN聚閤體的形成,cIFN單體量為570mg/L,髮酵上清液抗病毒活性為1.05×109IU/mL.與控製誘導相溫度為30℃相比,cIFN單體量提高瞭7.2倍,髮酵上清液中單位體積的cIFN抗病毒活性提高瞭38.7倍.
연구료Pichiapastoris표체중조인복합α간우소(cIFN)시유도기온도대cIFN형성취합체적영향.재5L관상고찰필적효모재불동온도(30、25、20℃)하유도시균체생장화cIFN표체적차이,발현필적효모재20℃하균체생장불수영향,총단백표체량유소강저,상당우30℃발효시포외총단백적67.8%.단시통과비환원성전영、Native-PAGE급Western blotting분석발현교고온도(30℃)유도표체시,분비도포외적cIFN용역형성취합체,단체함량흔소.유도상공제온도위20℃시,명현강저료cIFN취합체적형성,cIFN단체량위570mg/L,발효상청액항병독활성위1.05×109IU/mL.여공제유도상온도위30℃상비,cIFN단체량제고료7.2배,발효상청액중단위체적적cIFN항병독활성제고료38.7배.
