广西农业生物科学
廣西農業生物科學
엄서농업생물과학
JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE
2006年
1期
11-17
,共7页
稻瘟病菌%苯菌灵%β-tubulin基因%选择标记
稻瘟病菌%苯菌靈%β-tubulin基因%選擇標記
도온병균%분균령%β-tubulin기인%선택표기
用由稻瘟病菌gpd基因启动子和终止子序列控制的、以粗糙脉孢菌的微管蛋白β-tubulin(Bm1)突变基因为选择标记的表达载体,转化稻瘟病菌0742野生型菌株,获得了两株具有苯菌灵抗性的菌株M1和M2.但Southern杂交表明,这两个菌株并不是由于质粒转化而获得苯菌灵抗性.对稻瘟病菌0742野生型及突变体M1、M2的β-tubulin基因的序列比对分析表明,突变体M1在内源β-tubulin基因的第56、178、1704位置上发生了点突变,M2在第56、899、1040、1389、1704位置上发生了点突变,导致M1的352位氨基酸由苏氨酸变成了丙氨酸,M2的107、154、270、352位氨基酸分别由苏氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸变为丙氨酸、谷氨酸、丝氨酸、丙氨酸.计算机分析显示M1和M2突变体β-tubulin基因编码的蛋白质疏水性发生了微弱改变,结构域没有受到影响.该发现为开发新的稻瘟病菌遗传选择标记提供依据.
用由稻瘟病菌gpd基因啟動子和終止子序列控製的、以粗糙脈孢菌的微管蛋白β-tubulin(Bm1)突變基因為選擇標記的錶達載體,轉化稻瘟病菌0742野生型菌株,穫得瞭兩株具有苯菌靈抗性的菌株M1和M2.但Southern雜交錶明,這兩箇菌株併不是由于質粒轉化而穫得苯菌靈抗性.對稻瘟病菌0742野生型及突變體M1、M2的β-tubulin基因的序列比對分析錶明,突變體M1在內源β-tubulin基因的第56、178、1704位置上髮生瞭點突變,M2在第56、899、1040、1389、1704位置上髮生瞭點突變,導緻M1的352位氨基痠由囌氨痠變成瞭丙氨痠,M2的107、154、270、352位氨基痠分彆由囌氨痠、賴氨痠、苯丙氨痠、囌氨痠變為丙氨痠、穀氨痠、絲氨痠、丙氨痠.計算機分析顯示M1和M2突變體β-tubulin基因編碼的蛋白質疏水性髮生瞭微弱改變,結構域沒有受到影響.該髮現為開髮新的稻瘟病菌遺傳選擇標記提供依據.
용유도온병균gpd기인계동자화종지자서렬공제적、이조조맥포균적미관단백β-tubulin(Bm1)돌변기인위선택표기적표체재체,전화도온병균0742야생형균주,획득료량주구유분균령항성적균주M1화M2.단Southern잡교표명,저량개균주병불시유우질립전화이획득분균령항성.대도온병균0742야생형급돌변체M1、M2적β-tubulin기인적서렬비대분석표명,돌변체M1재내원β-tubulin기인적제56、178、1704위치상발생료점돌변,M2재제56、899、1040、1389、1704위치상발생료점돌변,도치M1적352위안기산유소안산변성료병안산,M2적107、154、270、352위안기산분별유소안산、뢰안산、분병안산、소안산변위병안산、곡안산、사안산、병안산.계산궤분석현시M1화M2돌변체β-tubulin기인편마적단백질소수성발생료미약개변,결구역몰유수도영향.해발현위개발신적도온병균유전선택표기제공의거.