中国科学C辑
中國科學C輯
중국과학C집
SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
2004年
1期
14-22
,共9页
王江%李琳%宛新杉%安林升%张景六
王江%李琳%宛新杉%安林升%張景六
왕강%리림%완신삼%안림승%장경륙
Ds转座因子%T-DNA%突变遗传学%水稻
Ds轉座因子%T-DNA%突變遺傳學%水稻
Ds전좌인자%T-DNA%돌변유전학%수도
应用农杆菌介导的方法获得了有Ds因子插入的3000多株水稻转化群体, 用Inverse PCR方法, 从部分独立转化植株中分离了590条含Ds因子的T-DNA插入位点处的右侧旁邻水稻染色体序列.根据旁邻序列中T-DNA右边界与侧翼水稻序列之间的插入序列的特征可分成6个主要类别, 其中类型Ⅰ是主要类型, 为通常的T-DNA整合, 即T-DNA右边界序列与水稻染色体序列相连, 或者其间插入小于50 bp的序列片段; 类型Ⅱ为T-DNA右边界旁先接T-DNA载体序列, 再与水稻序列相接的重组类型.340个类型Ⅰ和Ⅱ的旁邻序列通过与已知的水稻染色体序列数据库一致性比较分析, 确定了它们在水稻染色体上的分布位置, 构建了一个Ds因子在水稻12条染色体插入的框架结构.这340个有Ds因子插入的位点在整个染色体上平均相距0.8 Mb.分析在第1条染色体上T-DNA(Ds)插入情况显示有21％的频率插入到预测基因的外显子中.T-DNA(Ds)在染色体上分布位置的确定, 使我们可以选择合适的Ds因子插入株作为起始株系, 导入Ac转座酶基因后, 使Ds发生转座, 从而获得新的Ds插入突变株, 为进一步利用Ds转座标签法分离水稻基因创造了条件.
應用農桿菌介導的方法穫得瞭有Ds因子插入的3000多株水稻轉化群體, 用Inverse PCR方法, 從部分獨立轉化植株中分離瞭590條含Ds因子的T-DNA插入位點處的右側徬鄰水稻染色體序列.根據徬鄰序列中T-DNA右邊界與側翼水稻序列之間的插入序列的特徵可分成6箇主要類彆, 其中類型Ⅰ是主要類型, 為通常的T-DNA整閤, 即T-DNA右邊界序列與水稻染色體序列相連, 或者其間插入小于50 bp的序列片段; 類型Ⅱ為T-DNA右邊界徬先接T-DNA載體序列, 再與水稻序列相接的重組類型.340箇類型Ⅰ和Ⅱ的徬鄰序列通過與已知的水稻染色體序列數據庫一緻性比較分析, 確定瞭它們在水稻染色體上的分佈位置, 構建瞭一箇Ds因子在水稻12條染色體插入的框架結構.這340箇有Ds因子插入的位點在整箇染色體上平均相距0.8 Mb.分析在第1條染色體上T-DNA(Ds)插入情況顯示有21％的頻率插入到預測基因的外顯子中.T-DNA(Ds)在染色體上分佈位置的確定, 使我們可以選擇閤適的Ds因子插入株作為起始株繫, 導入Ac轉座酶基因後, 使Ds髮生轉座, 從而穫得新的Ds插入突變株, 為進一步利用Ds轉座標籤法分離水稻基因創造瞭條件.
응용농간균개도적방법획득료유Ds인자삽입적3000다주수도전화군체, 용Inverse PCR방법, 종부분독립전화식주중분리료590조함Ds인자적T-DNA삽입위점처적우측방린수도염색체서렬.근거방린서렬중T-DNA우변계여측익수도서렬지간적삽입서렬적특정가분성6개주요유별, 기중류형Ⅰ시주요류형, 위통상적T-DNA정합, 즉T-DNA우변계서렬여수도염색체서렬상련, 혹자기간삽입소우50 bp적서렬편단; 류형Ⅱ위T-DNA우변계방선접T-DNA재체서렬, 재여수도서렬상접적중조류형.340개류형Ⅰ화Ⅱ적방린서렬통과여이지적수도염색체서렬수거고일치성비교분석, 학정료타문재수도염색체상적분포위치, 구건료일개Ds인자재수도12조염색체삽입적광가결구.저340개유Ds인자삽입적위점재정개염색체상평균상거0.8 Mb.분석재제1조염색체상T-DNA(Ds)삽입정황현시유21％적빈솔삽입도예측기인적외현자중.T-DNA(Ds)재염색체상분포위치적학정, 사아문가이선택합괄적Ds인자삽입주작위기시주계, 도입Ac전좌매기인후, 사Ds발생전좌, 종이획득신적Ds삽입돌변주, 위진일보이용Ds전좌표첨법분리수도기인창조료조건.
