中国人兽共患病杂志
中國人獸共患病雜誌
중국인수공환병잡지
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2001年
4期
27-29
,共3页
杨秋林%陆惠民%闵太善%黄伟达
楊鞦林%陸惠民%閔太善%黃偉達
양추림%륙혜민%민태선%황위체
弓形虫%P30%PCR%基因表达
弓形蟲%P30%PCR%基因錶達
궁형충%P30%PCR%기인표체
目的在大肠杆菌中高效表达P30抗原.方法采用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫昆山分离株cDNA文库中扩增得到编码P30抗原的基因,经DNA序列分析后导入表达载体pGEX-5x-3,然后在大肠杆菌BL21中进行表达,用亲和层析柱纯化表达产物,并以SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定.结果1、在我们比较的783个碱基中,弓形虫昆山分离株与RH株之间只有两个碱基不同;2、得到一分子量为54kDa的融合蛋白,占大肠杆菌总蛋白的38%.结论1、弓形虫昆山分离株与RH株的P30基因没有大的差异;2、在大肠杆菌中得到了P30融合蛋白的高效表达.
目的在大腸桿菌中高效錶達P30抗原.方法採用聚閤酶鏈反應(PCR)從弓形蟲昆山分離株cDNA文庫中擴增得到編碼P30抗原的基因,經DNA序列分析後導入錶達載體pGEX-5x-3,然後在大腸桿菌BL21中進行錶達,用親和層析柱純化錶達產物,併以SDS-PAGE和Western blotting進行鑒定.結果1、在我們比較的783箇堿基中,弓形蟲昆山分離株與RH株之間隻有兩箇堿基不同;2、得到一分子量為54kDa的融閤蛋白,佔大腸桿菌總蛋白的38%.結論1、弓形蟲昆山分離株與RH株的P30基因沒有大的差異;2、在大腸桿菌中得到瞭P30融閤蛋白的高效錶達.
목적재대장간균중고효표체P30항원.방법채용취합매련반응(PCR)종궁형충곤산분리주cDNA문고중확증득도편마P30항원적기인,경DNA서렬분석후도입표체재체pGEX-5x-3,연후재대장간균BL21중진행표체,용친화층석주순화표체산물,병이SDS-PAGE화Western blotting진행감정.결과1、재아문비교적783개감기중,궁형충곤산분리주여RH주지간지유량개감기불동;2、득도일분자량위54kDa적융합단백,점대장간균총단백적38%.결론1、궁형충곤산분리주여RH주적P30기인몰유대적차이;2、재대장간균중득도료P30융합단백적고효표체.