上海水产大学学报
上海水產大學學報
상해수산대학학보
JOURNAL OF SHANGHAI FISHERIES UNIVERSITY
2001年
3期
193-198
,共6页
海带%孢子体%随机扩增多态DNA%基因组DNA
海帶%孢子體%隨機擴增多態DNA%基因組DNA
해대%포자체%수궤확증다태DNA%기인조DNA
从海带孢子体的酶解单细胞中提取的基因组DNA,可用于随机扩增多态DNA(RAPD)的重复性研究.通过对扩增反应体系中各因子和扩增程序的梯度实验,确定优化反应体系为:0.2μmol/L引物,1.5mmol/LMg2+,100μmol/L dNTP,1.0 U Taq DNA聚合酶,30ng模板DNA;优化反应程序为:94℃变性2min,接着45个循环包括94℃变性1min,37℃退火1min,72℃延伸2min;最后72℃延伸10min.在此优化条件下得到的RAPD图谱有较好的特异性和重复性,为海带遗传多样性、种质鉴定、分子标记及辅助育种等研究提供了有用的手段.
從海帶孢子體的酶解單細胞中提取的基因組DNA,可用于隨機擴增多態DNA(RAPD)的重複性研究.通過對擴增反應體繫中各因子和擴增程序的梯度實驗,確定優化反應體繫為:0.2μmol/L引物,1.5mmol/LMg2+,100μmol/L dNTP,1.0 U Taq DNA聚閤酶,30ng模闆DNA;優化反應程序為:94℃變性2min,接著45箇循環包括94℃變性1min,37℃退火1min,72℃延伸2min;最後72℃延伸10min.在此優化條件下得到的RAPD圖譜有較好的特異性和重複性,為海帶遺傳多樣性、種質鑒定、分子標記及輔助育種等研究提供瞭有用的手段.
종해대포자체적매해단세포중제취적기인조DNA,가용우수궤확증다태DNA(RAPD)적중복성연구.통과대확증반응체계중각인자화확증정서적제도실험,학정우화반응체계위:0.2μmol/L인물,1.5mmol/LMg2+,100μmol/L dNTP,1.0 U Taq DNA취합매,30ng모판DNA;우화반응정서위:94℃변성2min,접착45개순배포괄94℃변성1min,37℃퇴화1min,72℃연신2min;최후72℃연신10min.재차우화조건하득도적RAPD도보유교호적특이성화중복성,위해대유전다양성、충질감정、분자표기급보조육충등연구제공료유용적수단.
