中国癌症杂志
中國癌癥雜誌
중국암증잡지
CHINA ONCOLOGY
2000年
4期
326-329
,共4页
启动子%Egr-1基因%辐射诱导%基因表达
啟動子%Egr-1基因%輻射誘導%基因錶達
계동자%Egr-1기인%복사유도%기인표체
目的:研究克隆小鼠Egr-1基因启动子及其辐射诱导基因表达特性.方法:用合成的一对引物,以BALB/c小鼠基因组为模板,扩增出449bp大小含6个CC(A/T)6GG基序的序列,通过亚克隆技术分别将其插入pBluescriptⅡ测序载体和pHGFP-S65T报告载体中.利用测序载体对克隆的DNA序列进行分析,报告质粒载体经LipofecTAMINE脂质体介导转染COS-7细胞后给予γ射线照射或H2O2处理,用流式细胞仪观察GFP表达阳性细胞数.结果:PCR扩增的DNA片段经测序证实与文献报道完全一致,报告质粒转细胞实验结果提示,照射或H2O2处理可经Egr-1基因启动子而诱导GFP(绿色荧光蛋白)的表达.结论:成功地克隆了Egr-1基因启动子,经照射能诱导报告基因GFP的表达,为今后的进一步深入研究奠定了基础.
目的:研究剋隆小鼠Egr-1基因啟動子及其輻射誘導基因錶達特性.方法:用閤成的一對引物,以BALB/c小鼠基因組為模闆,擴增齣449bp大小含6箇CC(A/T)6GG基序的序列,通過亞剋隆技術分彆將其插入pBluescriptⅡ測序載體和pHGFP-S65T報告載體中.利用測序載體對剋隆的DNA序列進行分析,報告質粒載體經LipofecTAMINE脂質體介導轉染COS-7細胞後給予γ射線照射或H2O2處理,用流式細胞儀觀察GFP錶達暘性細胞數.結果:PCR擴增的DNA片段經測序證實與文獻報道完全一緻,報告質粒轉細胞實驗結果提示,照射或H2O2處理可經Egr-1基因啟動子而誘導GFP(綠色熒光蛋白)的錶達.結論:成功地剋隆瞭Egr-1基因啟動子,經照射能誘導報告基因GFP的錶達,為今後的進一步深入研究奠定瞭基礎.
목적:연구극륭소서Egr-1기인계동자급기복사유도기인표체특성.방법:용합성적일대인물,이BALB/c소서기인조위모판,확증출449bp대소함6개CC(A/T)6GG기서적서렬,통과아극륭기술분별장기삽입pBluescriptⅡ측서재체화pHGFP-S65T보고재체중.이용측서재체대극륭적DNA서렬진행분석,보고질립재체경LipofecTAMINE지질체개도전염COS-7세포후급여γ사선조사혹H2O2처리,용류식세포의관찰GFP표체양성세포수.결과:PCR확증적DNA편단경측서증실여문헌보도완전일치,보고질립전세포실험결과제시,조사혹H2O2처리가경Egr-1기인계동자이유도GFP(록색형광단백)적표체.결론:성공지극륭료Egr-1기인계동자,경조사능유도보고기인GFP적표체,위금후적진일보심입연구전정료기출.
