基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2000年
3期
224-229
,共6页
恶性疟多表位疫苗%细胞毒T淋巴细胞%人类白细胞抗原I类分子
噁性瘧多錶位疫苗%細胞毒T淋巴細胞%人類白細胞抗原I類分子
악성학다표위역묘%세포독T림파세포%인류백세포항원I류분자
CTL是红前期恶性疟免疫防护的关键环节.MHC分子多态性和严格的种属特异性是限制CTL恶性疟重组疫苗研制的重要因素.本文选用中国人群常见的HLA I类分子A-2.1和B51限制的恶性疟CTL抗原表位TR26和SH6,进行表位DNA序列合成并将其克隆于真核表达载体,构建单表位DNA重组疫苗.同时应用同尾酶克隆技术,将上述表位DNA序列串联构建成双表位DNA重组疫苗pcDNA3.1 TS.将以上克隆在含相应HLA抗原分子的细胞株中进行表达.经细胞表面HLA I类分子表达水平检测证实,两个单表位DNA疫苗编码的短肽在细胞内的表达,明显促进相应HLA I类分子在细胞表面的表达,用流式细胞仪测定平均荧光强度可量化表达水平(P<0.05).串联双表位DNA疫苗编码的肽并不受其位置毗邻的影响,分别促进HLA-A0201和HLA-B51的表达(P<0.05),提示各自在相应细胞株内被加工递呈,此项研究提示:该串联表位疫苗可能为两种MHC遗传背景的人群提供免疫防护.
CTL是紅前期噁性瘧免疫防護的關鍵環節.MHC分子多態性和嚴格的種屬特異性是限製CTL噁性瘧重組疫苗研製的重要因素.本文選用中國人群常見的HLA I類分子A-2.1和B51限製的噁性瘧CTL抗原錶位TR26和SH6,進行錶位DNA序列閤成併將其剋隆于真覈錶達載體,構建單錶位DNA重組疫苗.同時應用同尾酶剋隆技術,將上述錶位DNA序列串聯構建成雙錶位DNA重組疫苗pcDNA3.1 TS.將以上剋隆在含相應HLA抗原分子的細胞株中進行錶達.經細胞錶麵HLA I類分子錶達水平檢測證實,兩箇單錶位DNA疫苗編碼的短肽在細胞內的錶達,明顯促進相應HLA I類分子在細胞錶麵的錶達,用流式細胞儀測定平均熒光彊度可量化錶達水平(P<0.05).串聯雙錶位DNA疫苗編碼的肽併不受其位置毗鄰的影響,分彆促進HLA-A0201和HLA-B51的錶達(P<0.05),提示各自在相應細胞株內被加工遞呈,此項研究提示:該串聯錶位疫苗可能為兩種MHC遺傳揹景的人群提供免疫防護.
CTL시홍전기악성학면역방호적관건배절.MHC분자다태성화엄격적충속특이성시한제CTL악성학중조역묘연제적중요인소.본문선용중국인군상견적HLA I류분자A-2.1화B51한제적악성학CTL항원표위TR26화SH6,진행표위DNA서렬합성병장기극륭우진핵표체재체,구건단표위DNA중조역묘.동시응용동미매극륭기술,장상술표위DNA서렬천련구건성쌍표위DNA중조역묘pcDNA3.1 TS.장이상극륭재함상응HLA항원분자적세포주중진행표체.경세포표면HLA I류분자표체수평검측증실,량개단표위DNA역묘편마적단태재세포내적표체,명현촉진상응HLA I류분자재세포표면적표체,용류식세포의측정평균형광강도가양화표체수평(P<0.05).천련쌍표위DNA역묘편마적태병불수기위치비린적영향,분별촉진HLA-A0201화HLA-B51적표체(P<0.05),제시각자재상응세포주내피가공체정,차항연구제시:해천련표위역묘가능위량충MHC유전배경적인군제공면역방호.