卫生毒理学杂志
衛生毒理學雜誌
위생독이학잡지
JOURNAL OF HEALTH TOXICOLOGY
2003年
2期
87-90
,共4页
江高峰%庄志雄%刘起展%何云%杜柳涛
江高峰%莊誌雄%劉起展%何雲%杜柳濤
강고봉%장지웅%류기전%하운%두류도
修复基因%hMTH1%反义RNA%转染%流式细胞术
脩複基因%hMTH1%反義RNA%轉染%流式細胞術
수복기인%hMTH1%반의RNA%전염%류식세포술
目的建立hMTH1缺陷细胞株,观察该缺陷所引起的生物学效应.方法用hMTH1基因反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体(pEGFP-C1-T)转染人胚肺成纤维细胞(HLF),半定量RT-PCR鉴定其对hMTH1基因mRNA表达的抑制效果.同时观察转染细胞生长形态,绘制生长曲线,用流式细胞术观察细胞周期,软琼脂培养法鉴定恶性程度.结果 pEGFP-C1-T载体在转染细胞内可较稳定表达,缺陷细胞株hMTH1 mRNA表达水平比HLF细胞下降了47%.hMTH1缺陷细胞生长形态无明显变化,细胞倍增时间为0.89 d,与HLF细胞0.93 d接近,细胞周期各时相未受影响,软琼脂培养未见细胞集落.结论 hMTH1缺陷细胞株成功建立,该缺陷不足以单独引起可观察的生物学效应.
目的建立hMTH1缺陷細胞株,觀察該缺陷所引起的生物學效應.方法用hMTH1基因反義RNA綠色熒光蛋白真覈錶達載體(pEGFP-C1-T)轉染人胚肺成纖維細胞(HLF),半定量RT-PCR鑒定其對hMTH1基因mRNA錶達的抑製效果.同時觀察轉染細胞生長形態,繪製生長麯線,用流式細胞術觀察細胞週期,軟瓊脂培養法鑒定噁性程度.結果 pEGFP-C1-T載體在轉染細胞內可較穩定錶達,缺陷細胞株hMTH1 mRNA錶達水平比HLF細胞下降瞭47%.hMTH1缺陷細胞生長形態無明顯變化,細胞倍增時間為0.89 d,與HLF細胞0.93 d接近,細胞週期各時相未受影響,軟瓊脂培養未見細胞集落.結論 hMTH1缺陷細胞株成功建立,該缺陷不足以單獨引起可觀察的生物學效應.
목적건립hMTH1결함세포주,관찰해결함소인기적생물학효응.방법용hMTH1기인반의RNA록색형광단백진핵표체재체(pEGFP-C1-T)전염인배폐성섬유세포(HLF),반정량RT-PCR감정기대hMTH1기인mRNA표체적억제효과.동시관찰전염세포생장형태,회제생장곡선,용류식세포술관찰세포주기,연경지배양법감정악성정도.결과 pEGFP-C1-T재체재전염세포내가교은정표체,결함세포주hMTH1 mRNA표체수평비HLF세포하강료47%.hMTH1결함세포생장형태무명현변화,세포배증시간위0.89 d,여HLF세포0.93 d접근,세포주기각시상미수영향,연경지배양미견세포집락.결론 hMTH1결함세포주성공건립,해결함불족이단독인기가관찰적생물학효응.
