畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2002年
3期
267-270
,共4页
钟秋芳%肖希龙%章红%William P.Norred%F.Meredith
鐘鞦芳%肖希龍%章紅%William P.Norred%F.Meredith
종추방%초희룡%장홍%William P.Norred%F.Meredith
腐马素B1%单克隆抗体%真菌毒素
腐馬素B1%單剋隆抗體%真菌毒素
부마소B1%단극륭항체%진균독소
本研究采用戊二醛一步法制备免疫抗原FB1-KLH和包被抗原FB1-BSA,免疫BALB/c小鼠,建立间接酶联免疫吸附法(I-ELISA)并测定血清效价.结果表明:FB1-BSA最适包被浓度为1 μg/ml,抗体最适稀释度为1∶10 000,血清效价可达1∶128 000.第4次免疫后,通过淋巴细胞杂交瘤技术建立分泌FB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,融合率为96%,阳性率为98%.细胞上清抗体ELISA效价为1∶3.2×106,腹水抗体效价为1∶8×108.经鉴定,该株单抗的亚类为IgG1,分子量为185.4 KDa,染色体数目介于96～104之间,亲和常数为1.16×107 M-1,与另三种常见的真菌毒素(串珠镰刀菌素,T-2毒素,玉米赤霉烯酮)和两种载体蛋白(牛血清白蛋白,血蓝蛋白)无交叉反应,稳定性良好.
本研究採用戊二醛一步法製備免疫抗原FB1-KLH和包被抗原FB1-BSA,免疫BALB/c小鼠,建立間接酶聯免疫吸附法(I-ELISA)併測定血清效價.結果錶明:FB1-BSA最適包被濃度為1 μg/ml,抗體最適稀釋度為1∶10 000,血清效價可達1∶128 000.第4次免疫後,通過淋巴細胞雜交瘤技術建立分泌FB1單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,融閤率為96%,暘性率為98%.細胞上清抗體ELISA效價為1∶3.2×106,腹水抗體效價為1∶8×108.經鑒定,該株單抗的亞類為IgG1,分子量為185.4 KDa,染色體數目介于96～104之間,親和常數為1.16×107 M-1,與另三種常見的真菌毒素(串珠鐮刀菌素,T-2毒素,玉米赤黴烯酮)和兩種載體蛋白(牛血清白蛋白,血藍蛋白)無交扠反應,穩定性良好.
본연구채용무이철일보법제비면역항원FB1-KLH화포피항원FB1-BSA,면역BALB/c소서,건립간접매련면역흡부법(I-ELISA)병측정혈청효개.결과표명:FB1-BSA최괄포피농도위1 μg/ml,항체최괄희석도위1∶10 000,혈청효개가체1∶128 000.제4차면역후,통과림파세포잡교류기술건립분비FB1단극륭항체적잡교류세포주,융합솔위96%,양성솔위98%.세포상청항체ELISA효개위1∶3.2×106,복수항체효개위1∶8×108.경감정,해주단항적아류위IgG1,분자량위185.4 KDa,염색체수목개우96～104지간,친화상수위1.16×107 M-1,여령삼충상견적진균독소(천주렴도균소,T-2독소,옥미적매희동)화량충재체단백(우혈청백단백,혈람단백)무교차반응,은정성량호.
