中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2002年
1期
92-98
,共7页
朱茂祥%杨陟华%龚诒芬%曹珍山%陆颖%Tom K.HEI
硃茂祥%楊陟華%龔詒芬%曹珍山%陸穎%Tom K.HEI
주무상%양척화%공이분%조진산%륙영%Tom K.HEI
活性氧%人类11号染色体%基因突变%突变谱
活性氧%人類11號染色體%基因突變%突變譜
활성양%인류11호염색체%기인돌변%돌변보
对体外产生的和内源性刺激产生的活性氧(ROS)诱发人类11号染色体(Hchr11)基因突变规律及其突变谱进行研究.体外羟自由基(@OH)用过氧化氢(H2O2)与Fe2+反应产生,并用化学发光(CL)进行相对定量分析;内源性ROS用佛波醇酯(PMA)刺激人外周血白细胞产生,并用CL和特异性抗氧化物检测和鉴定;用包含单条Hchr11的人-中国仓鼠卵巢细胞(AL)为靶,经CD59表面抗原抗体筛选突变细胞克隆,研究ROS诱发的Hchr11基因突变;突变克隆细胞DNA用Hchr11上5种标志基因引物进行多重PCR分析,结合琼脂糖凝胶电泳绘制基因突变谱.结果表明,体外ROS可诱发Hchr11基因突变,且@OH诱发基因突变的能力明显强于H2O2,两者的突变谱也存在明显差异;PMA可刺激人外周血白细胞产生大量的多种ROS,并诱发Hch11基因突变,突变谱综合了H2O2和@OH的所有特征;一些抗氧化物对内源性产生的ROS诱发Hchr11基因突变有明显抑制作用.提示体外和内源性ROS可诱发Hchr11基因突变,不同的活性氧分子诱发的基因突变可能具有特异性.
對體外產生的和內源性刺激產生的活性氧(ROS)誘髮人類11號染色體(Hchr11)基因突變規律及其突變譜進行研究.體外羥自由基(@OH)用過氧化氫(H2O2)與Fe2+反應產生,併用化學髮光(CL)進行相對定量分析;內源性ROS用彿波醇酯(PMA)刺激人外週血白細胞產生,併用CL和特異性抗氧化物檢測和鑒定;用包含單條Hchr11的人-中國倉鼠卵巢細胞(AL)為靶,經CD59錶麵抗原抗體篩選突變細胞剋隆,研究ROS誘髮的Hchr11基因突變;突變剋隆細胞DNA用Hchr11上5種標誌基因引物進行多重PCR分析,結閤瓊脂糖凝膠電泳繪製基因突變譜.結果錶明,體外ROS可誘髮Hchr11基因突變,且@OH誘髮基因突變的能力明顯彊于H2O2,兩者的突變譜也存在明顯差異;PMA可刺激人外週血白細胞產生大量的多種ROS,併誘髮Hch11基因突變,突變譜綜閤瞭H2O2和@OH的所有特徵;一些抗氧化物對內源性產生的ROS誘髮Hchr11基因突變有明顯抑製作用.提示體外和內源性ROS可誘髮Hchr11基因突變,不同的活性氧分子誘髮的基因突變可能具有特異性.
대체외산생적화내원성자격산생적활성양(ROS)유발인류11호염색체(Hchr11)기인돌변규률급기돌변보진행연구.체외간자유기(@OH)용과양화경(H2O2)여Fe2+반응산생,병용화학발광(CL)진행상대정량분석;내원성ROS용불파순지(PMA)자격인외주혈백세포산생,병용CL화특이성항양화물검측화감정;용포함단조Hchr11적인-중국창서란소세포(AL)위파,경CD59표면항원항체사선돌변세포극륭,연구ROS유발적Hchr11기인돌변;돌변극륭세포DNA용Hchr11상5충표지기인인물진행다중PCR분석,결합경지당응효전영회제기인돌변보.결과표명,체외ROS가유발Hchr11기인돌변,차@OH유발기인돌변적능력명현강우H2O2,량자적돌변보야존재명현차이;PMA가자격인외주혈백세포산생대량적다충ROS,병유발Hch11기인돌변,돌변보종합료H2O2화@OH적소유특정;일사항양화물대내원성산생적ROS유발Hchr11기인돌변유명현억제작용.제시체외화내원성ROS가유발Hchr11기인돌변,불동적활성양분자유발적기인돌변가능구유특이성.
