遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2002年
2期
177-178
,共2页
胡学军%李晶泉%袁晓东%徐红梅%赵东利
鬍學軍%李晶泉%袁曉東%徐紅梅%趙東利
호학군%리정천%원효동%서홍매%조동리
T-载体%pUC118%PCR产物%限制酶Eam1105 I
T-載體%pUC118%PCR產物%限製酶Eam1105 I
T-재체%pUC118%PCR산물%한제매Eam1105 I
本文描述一种构建与PCR产物直接连接的克隆载体的方法.以高拷贝克隆载体pUC118为骨架载体,在pUC118质粒氨苄抗性基因的Eam1105 I 酶切位点上,以点突变的方式封闭Eam1105 I 酶切位点.经转化大肠杆菌JM109证实,该改造过的pUC118质粒,可使宿主细胞仍具有氨苄抗性.将一人工合成的具有两个Eam1105 I 酶切位点的互补寡聚核苷酸链(两端具有BamH I 接头)插入已封闭Eam1105 I 酶切位点的pUC118*载体的BamH I 位点,构成新的克隆载体,此质粒命名为pUC118E.该载体经Eam1105 I 酶切后,可产生3′末端突出一个T碱基的T-载体,能与PCR产物直接连接.
本文描述一種構建與PCR產物直接連接的剋隆載體的方法.以高拷貝剋隆載體pUC118為骨架載體,在pUC118質粒氨芐抗性基因的Eam1105 I 酶切位點上,以點突變的方式封閉Eam1105 I 酶切位點.經轉化大腸桿菌JM109證實,該改造過的pUC118質粒,可使宿主細胞仍具有氨芐抗性.將一人工閤成的具有兩箇Eam1105 I 酶切位點的互補寡聚覈苷痠鏈(兩耑具有BamH I 接頭)插入已封閉Eam1105 I 酶切位點的pUC118*載體的BamH I 位點,構成新的剋隆載體,此質粒命名為pUC118E.該載體經Eam1105 I 酶切後,可產生3′末耑突齣一箇T堿基的T-載體,能與PCR產物直接連接.
본문묘술일충구건여PCR산물직접련접적극륭재체적방법.이고고패극륭재체pUC118위골가재체,재pUC118질립안변항성기인적Eam1105 I 매절위점상,이점돌변적방식봉폐Eam1105 I 매절위점.경전화대장간균JM109증실,해개조과적pUC118질립,가사숙주세포잉구유안변항성.장일인공합성적구유량개Eam1105 I 매절위점적호보과취핵감산련(량단구유BamH I 접두)삽입이봉폐Eam1105 I 매절위점적pUC118*재체적BamH I 위점,구성신적극륭재체,차질립명명위pUC118E.해재체경Eam1105 I 매절후,가산생3′말단돌출일개T감기적T-재체,능여PCR산물직접련접.
