科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2001年
20期
1717-1721
,共5页
张靖溥%王玉阁%李光三%沈玉%朱少侠%杜淼
張靖溥%王玉閣%李光三%瀋玉%硃少俠%杜淼
장정부%왕옥각%리광삼%침옥%주소협%두묘
核定位蛋白%细胞质注射%转基因小鼠%人粒细胞集落因子%整合与表达
覈定位蛋白%細胞質註射%轉基因小鼠%人粒細胞集落因子%整閤與錶達
핵정위단백%세포질주사%전기인소서%인립세포집락인자%정합여표체
采用细胞质共注射方法,将目的基因表达构件牛α-sI-casein-hG-CSF和哺乳类核定位基因表达构件导入受精卵细胞质,利用核定位蛋白的定向迁移功能,将目的基因表达构件带入原核,获得转基因小鼠.这种转基因途径不仅可以提高转基因小鼠的出生率,而且整合率达58%(29/50),表达率达75%.用Western blotting方法初步估算表达水平在60～550 mg/L乳清.因此这种转基因方法可以替代受精卵原核注射的转基因方法,且效率高、方法简单、实用,便于推广.
採用細胞質共註射方法,將目的基因錶達構件牛α-sI-casein-hG-CSF和哺乳類覈定位基因錶達構件導入受精卵細胞質,利用覈定位蛋白的定嚮遷移功能,將目的基因錶達構件帶入原覈,穫得轉基因小鼠.這種轉基因途徑不僅可以提高轉基因小鼠的齣生率,而且整閤率達58%(29/50),錶達率達75%.用Western blotting方法初步估算錶達水平在60～550 mg/L乳清.因此這種轉基因方法可以替代受精卵原覈註射的轉基因方法,且效率高、方法簡單、實用,便于推廣.
채용세포질공주사방법,장목적기인표체구건우α-sI-casein-hG-CSF화포유류핵정위기인표체구건도입수정란세포질,이용핵정위단백적정향천이공능,장목적기인표체구건대입원핵,획득전기인소서.저충전기인도경불부가이제고전기인소서적출생솔,이차정합솔체58%(29/50),표체솔체75%.용Western blotting방법초보고산표체수평재60～550 mg/L유청.인차저충전기인방법가이체대수정란원핵주사적전기인방법,차효솔고、방법간단、실용,편우추엄.
