CAJ | 학술논문

目的:建立源于重型再生障碍性贫血(重型再障)患者骨髓的T淋巴细胞克隆,以便研究该病的发病机理.方法:用免疫分选法分别从1名初诊重型再障患者及对照的骨髓中富集CD34+和CD3+细胞.将CD3+细胞作反应细胞、照射过CD34+细胞作刺激细胞,进行14 d单向自身混合淋巴细胞培养.对活细胞作有限稀释和单个细胞分孔接种,与含IL-2和PHA-P的饲养细胞体系共培养.观察挑选细胞生长孔,计算接种率,用泊松(Poisson)分布初步判断单个细胞分离过程成功与否.而后将阳性孔细胞作转孔培养,定期用饲养抚育刺激、常规用IL-2支持增殖以扩大各克隆的数量.用SABC-P免疫细胞化学染色法,初步鉴定各克隆CD4/CD8抗原表型.结果:自身混合淋巴细胞培养后的活细胞数,病例为4×103,对照为65.单细胞分离接种培养后,对照组的细胞生长孔数为0;而病例组的培养板上,共有11孔发生细胞增殖,相应的实际接种率是2.1%,未超出Poisson理论接种率值范围(＜26%),判明平均每个增生孔的细胞克隆前体数不大于1.这11个克隆中,9个呈CD4单阳性表型,阳性为98%;2个为CD8单阳性表型,阳性率为98%.结论:从1例重型再障患者骨髓中分离出了11株T淋巴细胞克隆.进一步鉴定分析这些克隆的表型和特异性,以及探讨其Th1(Tc1)/(Th2)(Tc2)效应类型等功能表现,对研究重型再障的免疫学机理具有积极的意义.
목적:건립원우중형재생장애성빈혈(중형재장)환자골수적T림파세포극륭,이편연구해병적발병궤리.방법:용면역분선법분별종1명초진중형재장환자급대조적골수중부집CD34+화CD3+세포.장CD3+세포작반응세포、조사과CD34+세포작자격세포,진행14 d단향자신혼합림파세포배양.대활세포작유한희석화단개세포분공접충,여함IL-2화PHA-P적사양세포체계공배양.관찰도선세포생장공,계산접충솔,용박송(Poisson)분포초보판단단개세포분리과정성공여부.이후장양성공세포작전공배양,정기용사양무육자격、상규용IL-2지지증식이확대각극륭적수량.용SABC-P면역세포화학염색법,초보감정각극륭CD4/CD8항원표형.결과:자신혼합림파세포배양후적활세포수,병례위4×103,대조위65.단세포분리접충배양후,대조조적세포생장공수위0;이병례조적배양판상,공유11공발생세포증식,상응적실제접충솔시2.1%,미초출Poisson이론접충솔치범위(＜26%),판명평균매개증생공적세포극륭전체수불대우1.저11개극륭중,9개정CD4단양성표형,양성위98%;2개위CD8단양성표형,양성솔위98%.결론:종1례중형재장환자골수중분리출료11주T림파세포극륭.진일보감정분석저사극륭적표형화특이성,이급탐토기Th1(Tc1)/(Th2)(Tc2)효응류형등공능표현,대연구중형재장적면역학궤리구유적겁적의의.