中国现代医学杂志
中國現代醫學雜誌
중국현대의학잡지
CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE
2001年
7期
17-19
,共3页
肝切除术%转染率%活体%脂质体%绿色荧光蛋白
肝切除術%轉染率%活體%脂質體%綠色熒光蛋白
간절제술%전염솔%활체%지질체%록색형광단백
目的:探讨70%切肝对大鼠肝细胞门静脉途径转基因效率的影响。方法:Wistar大鼠70%切肝[假手术组(sham operation,S)仅行开腹术]建立肝再生模型,术后24h肝隔离门静脉注射脂质体-质粒DNA复合物(lipofectamine -pEGFP-N1 DNA complexes,lipoplexes)转绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因至肝细胞,对照组注射生理盐水(NS)。转染后4d(分4组,每组5只:切肝并于门静脉注射lipoplexes组,He4;切肝并于门静脉注射NS组,Hc4;假手术并于门静脉注射lipoplexes组,Se4;假手术并于门静脉注射NS组,Sc4)、转染后15d(与转染后4d的对应分组为:He15;Hc15;Se15;Sc15)均以胶原酶消化、Percoll液梯离心法获取纯化肝细胞悬液;以NS组为对照并以GFP为荧光标记物,用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)分析各实验组肝细胞的转染率。结果:FCM分析He4组、Se4组、 He15组、Se15组的平均转染率(%)分别为:27.50±18.15、1.06±0.87、3.40±2.09、0.32±0.19;He4明显高于Se4(P<0.01),He15明显高于Se15(P<0.05)。结论:部分切肝可显著提高大鼠门静脉途径转基因的瞬时和稳定转染效率。
目的:探討70%切肝對大鼠肝細胞門靜脈途徑轉基因效率的影響。方法:Wistar大鼠70%切肝[假手術組(sham operation,S)僅行開腹術]建立肝再生模型,術後24h肝隔離門靜脈註射脂質體-質粒DNA複閤物(lipofectamine -pEGFP-N1 DNA complexes,lipoplexes)轉綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因至肝細胞,對照組註射生理鹽水(NS)。轉染後4d(分4組,每組5隻:切肝併于門靜脈註射lipoplexes組,He4;切肝併于門靜脈註射NS組,Hc4;假手術併于門靜脈註射lipoplexes組,Se4;假手術併于門靜脈註射NS組,Sc4)、轉染後15d(與轉染後4d的對應分組為:He15;Hc15;Se15;Sc15)均以膠原酶消化、Percoll液梯離心法穫取純化肝細胞懸液;以NS組為對照併以GFP為熒光標記物,用流式細胞儀(flow cytometry,FCM)分析各實驗組肝細胞的轉染率。結果:FCM分析He4組、Se4組、 He15組、Se15組的平均轉染率(%)分彆為:27.50±18.15、1.06±0.87、3.40±2.09、0.32±0.19;He4明顯高于Se4(P<0.01),He15明顯高于Se15(P<0.05)。結論:部分切肝可顯著提高大鼠門靜脈途徑轉基因的瞬時和穩定轉染效率。
목적:탐토70%절간대대서간세포문정맥도경전기인효솔적영향。방법:Wistar대서70%절간[가수술조(sham operation,S)부행개복술]건립간재생모형,술후24h간격리문정맥주사지질체-질립DNA복합물(lipofectamine -pEGFP-N1 DNA complexes,lipoplexes)전록색형광단백(green fluorescent protein,GFP)기인지간세포,대조조주사생리염수(NS)。전염후4d(분4조,매조5지:절간병우문정맥주사lipoplexes조,He4;절간병우문정맥주사NS조,Hc4;가수술병우문정맥주사lipoplexes조,Se4;가수술병우문정맥주사NS조,Sc4)、전염후15d(여전염후4d적대응분조위:He15;Hc15;Se15;Sc15)균이효원매소화、Percoll액제리심법획취순화간세포현액;이NS조위대조병이GFP위형광표기물,용류식세포의(flow cytometry,FCM)분석각실험조간세포적전염솔。결과:FCM분석He4조、Se4조、 He15조、Se15조적평균전염솔(%)분별위:27.50±18.15、1.06±0.87、3.40±2.09、0.32±0.19;He4명현고우Se4(P<0.01),He15명현고우Se15(P<0.05)。결론:부분절간가현저제고대서문정맥도경전기인적순시화은정전염효솔。