CAJ | 학술논문

目的获得一组抗人CD130胞内磷酸化酪氨酸单克隆抗体(mAb),用于研究IL-6介导的信号转导.方法按照CD130分子胞内N752-G766区的氨基酸序列,化学合成Y759磷酸化的15肽作为抗原,应用细胞融合法制备一组抗CD130磷酸化酪氨酸的mAb,并用ELISA、Western blot、免疫沉淀和免疫组化染色等技术,对这组mAb的性质和功能进行探讨.结果(1)通过细胞融合获得了4株稳定分泌抗CD130胞内Y759磷酸化mAb的杂交瘤细胞株(MIY1、MIY2、MIY3和MIY4),这组mAb仅对合成肽N752-G766产生特异性反应.(2)Western blot分析表明,这组mAb识别的靶分子的相对分子质量(Mt)为13×104～14×104的.用此组mAb免疫沉淀的Mr为13×104～14×104蛋白,可被抗CD130 mAb所识别;同时用抗CD130mAb免疫沉淀的13×104～14×104分子也可被这组mAb所识别;(3)进一步研究证实,这组mAb可识别由IL-6诱导的细胞内酪氨酸磷酸化的蛋白分子.结论成功地研制了抗人CD130胞内磷酸化酪氨酸的mAb.
목적획득일조항인CD130포내린산화락안산단극륭항체(mAb),용우연구IL-6개도적신호전도.방법안조CD130분자포내N752-G766구적안기산서렬,화학합성Y759린산화적15태작위항원,응용세포융합법제비일조항CD130린산화락안산적mAb,병용ELISA、Western blot、면역침정화면역조화염색등기술,대저조mAb적성질화공능진행탐토.결과(1)통과세포융합획득료4주은정분비항CD130포내Y759린산화mAb적잡교류세포주(MIY1、MIY2、MIY3화MIY4),저조mAb부대합성태N752-G766산생특이성반응.(2)Western blot분석표명,저조mAb식별적파분자적상대분자질량(Mt)위13×104～14×104적.용차조mAb면역침정적Mr위13×104～14×104단백,가피항CD130 mAb소식별;동시용항CD130mAb면역침정적13×104～14×104분자야가피저조mAb소식별;(3)진일보연구증실,저조mAb가식별유IL-6유도적세포내락안산린산화적단백분자.결론성공지연제료항인CD130포내린산화락안산적mAb.