畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2007年
1期
53-58
,共6页
李自力%陈焕春%徐高原%方六荣%肖少波%王祥%何启盖
李自力%陳煥春%徐高原%方六榮%肖少波%王祥%何啟蓋
리자력%진환춘%서고원%방륙영%초소파%왕상%하계개
乙型脑炎病毒%PrM基因%重组伪狂犬病病毒
乙型腦炎病毒%PrM基因%重組偽狂犬病病毒
을형뇌염병독%PrM기인%중조위광견병병독
本研究以乙型脑炎病毒SA14-14-2疫苗株基因组RNA为模板,采用RT-PCR一步法扩增了PrM基因的全长cDNA(558 bp),用BamHI和 EcoRI双酶切PrM基因的扩增产物,回收目的基因后将其克隆至经同样酶切的伪狂犬病病毒通用转移载体pPgG-uni中,获得了转移载体pPgG-PrM,并对其外源片段进行了测序.序列分析结果表明:与已报道的乙型脑炎病毒SA14强毒株和SA14-14-2疫苗株的核苷酸序列比较, PrM基因的同源性为100%.以伪狂犬病病毒Ea株TK-/gG-/LacZ+突变株为载体构建了一株表达乙型脑炎病毒PrM基因的重组伪狂犬病病毒TK-/gG-/PrM+,为进一步开展猪乙型脑炎与伪狂犬病二价基因工程疫苗的研究奠定了基础.
本研究以乙型腦炎病毒SA14-14-2疫苗株基因組RNA為模闆,採用RT-PCR一步法擴增瞭PrM基因的全長cDNA(558 bp),用BamHI和 EcoRI雙酶切PrM基因的擴增產物,迴收目的基因後將其剋隆至經同樣酶切的偽狂犬病病毒通用轉移載體pPgG-uni中,穫得瞭轉移載體pPgG-PrM,併對其外源片段進行瞭測序.序列分析結果錶明:與已報道的乙型腦炎病毒SA14彊毒株和SA14-14-2疫苗株的覈苷痠序列比較, PrM基因的同源性為100%.以偽狂犬病病毒Ea株TK-/gG-/LacZ+突變株為載體構建瞭一株錶達乙型腦炎病毒PrM基因的重組偽狂犬病病毒TK-/gG-/PrM+,為進一步開展豬乙型腦炎與偽狂犬病二價基因工程疫苗的研究奠定瞭基礎.
본연구이을형뇌염병독SA14-14-2역묘주기인조RNA위모판,채용RT-PCR일보법확증료PrM기인적전장cDNA(558 bp),용BamHI화 EcoRI쌍매절PrM기인적확증산물,회수목적기인후장기극륭지경동양매절적위광견병병독통용전이재체pPgG-uni중,획득료전이재체pPgG-PrM,병대기외원편단진행료측서.서렬분석결과표명:여이보도적을형뇌염병독SA14강독주화SA14-14-2역묘주적핵감산서렬비교, PrM기인적동원성위100%.이위광견병병독Ea주TK-/gG-/LacZ+돌변주위재체구건료일주표체을형뇌염병독PrM기인적중조위광견병병독TK-/gG-/PrM+,위진일보개전저을형뇌염여위광견병이개기인공정역묘적연구전정료기출.
