浙江农业学报
浙江農業學報
절강농업학보
ACTA AGRICULTURAE ZHEJIANGENSIS
2008年
2期
88-91
,共4页
徐根亮%由振强%余夏萌%吕冬梅%于涟
徐根亮%由振彊%餘夏萌%呂鼕梅%于漣
서근량%유진강%여하맹%려동매%우련
萧山鸡γ-干扰素%RT-PCR%原核表达%真核表达载体
蕭山鷄γ-榦擾素%RT-PCR%原覈錶達%真覈錶達載體
소산계γ-간우소%RT-PCR%원핵표체%진핵표체재체
以有丝分裂原ConA诱导鸡脾脏淋巴细胞,用Trizol试剂提取细胞总RNA,利用RT-PCR技术获得了萧山鸡γ-干扰素成熟蛋白基因495 bp的序列,GenBank登录号为DQ470471.序列分析表明,与已经发表的鸡γ-干扰素成熟蛋白基因序列的核苷酸同源性为95%～99.9%.将该cDNA序列构建得到鸡γ-干扰素的原核表达载体pET30a-ChIFN-γ,成功在大肠杆菌中表达了分子量20.88 kD的目的蛋白,与预期分子量一致;并构建得到了鸡γ-干扰素的pCI真核表达载体(pCI-ChIFN-γ).
以有絲分裂原ConA誘導鷄脾髒淋巴細胞,用Trizol試劑提取細胞總RNA,利用RT-PCR技術穫得瞭蕭山鷄γ-榦擾素成熟蛋白基因495 bp的序列,GenBank登錄號為DQ470471.序列分析錶明,與已經髮錶的鷄γ-榦擾素成熟蛋白基因序列的覈苷痠同源性為95%～99.9%.將該cDNA序列構建得到鷄γ-榦擾素的原覈錶達載體pET30a-ChIFN-γ,成功在大腸桿菌中錶達瞭分子量20.88 kD的目的蛋白,與預期分子量一緻;併構建得到瞭鷄γ-榦擾素的pCI真覈錶達載體(pCI-ChIFN-γ).
이유사분렬원ConA유도계비장림파세포,용Trizol시제제취세포총RNA,이용RT-PCR기술획득료소산계γ-간우소성숙단백기인495 bp적서렬,GenBank등록호위DQ470471.서렬분석표명,여이경발표적계γ-간우소성숙단백기인서렬적핵감산동원성위95%～99.9%.장해cDNA서렬구건득도계γ-간우소적원핵표체재체pET30a-ChIFN-γ,성공재대장간균중표체료분자량20.88 kD적목적단백,여예기분자량일치;병구건득도료계γ-간우소적pCI진핵표체재체(pCI-ChIFN-γ).
