中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2009年
3期
321-325
,共5页
刘丹%何明%易波%阙爱玲%徐江晶%张吉翔
劉丹%何明%易波%闕愛玲%徐江晶%張吉翔
류단%하명%역파%궐애령%서강정%장길상
原癌基因%Pim-3%缺氧/复氧损伤%缺氧预适应%心肌保护
原癌基因%Pim-3%缺氧/複氧損傷%缺氧預適應%心肌保護
원암기인%Pim-3%결양/복양손상%결양예괄응%심기보호
目的 研究原癌基因Pim-3对心肌细胞急性缺氧/复氧(A/R)损伤的保护作用.方法 采用原代培养新生大鼠的心肌细胞A/R损伤和缺氧预适应(APC)保护模型,将已经构建好的pEGFP-N2/Pim-3质粒导入原代培养的乳鼠心肌细胞中,实验结束后测定Pim-3 mRNA及蛋白表达水平(RT-PCR、Western blot法)的改变,同时检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH) 活性、四唑盐(MTT)比色试验测定细胞存活率、TUNEL法检测细胞凋亡.结果 RT-PCR和Western blot结果显示,Pim-3在正常组几乎不表达,A/R组表达明显升高,缺氧预适应(APC)+A/R组表达则进一步升高;转染pEGFP-N2/Pim-3质粒后24 h,荧光倒置显微镜显示转染效率达30%;在A/R损伤后,Pim-3基因转染组较未转染组的心肌细胞LDH值明显降低,细胞存活率则明显升高,心肌细胞的凋亡指数明显下降.结论 在细胞水平,Pim-3参与心肌APC保护作用,导入外源性的Pim-3基因能对抗急性A/R损伤.
目的 研究原癌基因Pim-3對心肌細胞急性缺氧/複氧(A/R)損傷的保護作用.方法 採用原代培養新生大鼠的心肌細胞A/R損傷和缺氧預適應(APC)保護模型,將已經構建好的pEGFP-N2/Pim-3質粒導入原代培養的乳鼠心肌細胞中,實驗結束後測定Pim-3 mRNA及蛋白錶達水平(RT-PCR、Western blot法)的改變,同時檢測培養液中乳痠脫氫酶(LDH) 活性、四唑鹽(MTT)比色試驗測定細胞存活率、TUNEL法檢測細胞凋亡.結果 RT-PCR和Western blot結果顯示,Pim-3在正常組幾乎不錶達,A/R組錶達明顯升高,缺氧預適應(APC)+A/R組錶達則進一步升高;轉染pEGFP-N2/Pim-3質粒後24 h,熒光倒置顯微鏡顯示轉染效率達30%;在A/R損傷後,Pim-3基因轉染組較未轉染組的心肌細胞LDH值明顯降低,細胞存活率則明顯升高,心肌細胞的凋亡指數明顯下降.結論 在細胞水平,Pim-3參與心肌APC保護作用,導入外源性的Pim-3基因能對抗急性A/R損傷.
목적 연구원암기인Pim-3대심기세포급성결양/복양(A/R)손상적보호작용.방법 채용원대배양신생대서적심기세포A/R손상화결양예괄응(APC)보호모형,장이경구건호적pEGFP-N2/Pim-3질립도입원대배양적유서심기세포중,실험결속후측정Pim-3 mRNA급단백표체수평(RT-PCR、Western blot법)적개변,동시검측배양액중유산탈경매(LDH) 활성、사서염(MTT)비색시험측정세포존활솔、TUNEL법검측세포조망.결과 RT-PCR화Western blot결과현시,Pim-3재정상조궤호불표체,A/R조표체명현승고,결양예괄응(APC)+A/R조표체칙진일보승고;전염pEGFP-N2/Pim-3질립후24 h,형광도치현미경현시전염효솔체30%;재A/R손상후,Pim-3기인전염조교미전염조적심기세포LDH치명현강저,세포존활솔칙명현승고,심기세포적조망지수명현하강.결론 재세포수평,Pim-3삼여심기APC보호작용,도입외원성적Pim-3기인능대항급성A/R손상.
