临床肺科杂志
臨床肺科雜誌
림상폐과잡지
JOUNAL OF CLINICAL PULMONARY MEDICINE
2009年
10期
1281-1284
,共4页
结核分枝杆菌%ag85a-卡介苗重组疫苗%保护作用
結覈分枝桿菌%ag85a-卡介苗重組疫苗%保護作用
결핵분지간균%ag85a-잡개묘중조역묘%보호작용
目的 构建结核分枝杆菌ag85a-卡介苗重组疫苗,研究其免疫原性及抗结核作用,以期获得结核病预防性或治疗性疫苗.方法 通过基因工程重组技术将结核分枝杆菌保护性抗原Ag85A的编码基因与穿梭质粒载体pYUB295重组,采用电穿孔技术导入卡介苗中,应用PCR扩增、PAGE电泳鉴定重组卡介苗.通过ELISA法检测其免疫小鼠血清中特异性抗体,用MTS法分析其脾淋巴细胞增殖指数.通过观察ag85a-卡介苗重组疫苗对结核分枝杆菌感染实验动物半数死亡时间、一定时间内的死亡率、大体病变、T细胞及B细胞免疫功能等指标评价ag85a-卡介苗重组疫苗对结核分枝杆菌感染的预防效果.结果 PCR扩增、限制性内切酶酶切、DNA测序鉴定、PAGE电泳表明成功地构建了ag85a基因pYUB295重组质粒,Ag85A蛋白在卡介苗中分泌表达.重组卡介苗免疫原性试验表明:ag85a-卡介苗重组疫苗免疫组小鼠有Ag85A特异性抗体产生, 45天时达到最高水平.脾淋巴细胞增殖试验表明刺激指数均达2.0以上,ag85a-卡介苗重组疫苗免疫组小鼠脾淋巴细胞的刺激指数与对照组无明显区别.预防试验表明:ag85a-卡介苗重组疫苗组、卡介苗组与生理盐水对照组比都能延长结核分枝杆菌感染小鼠的半数死亡时间,降低2个月内的死亡率.结核分支杆菌攻击后2个月,处死小鼠时,小鼠脏器大体病变、脏器培养、抗体检测结果及淋巴细胞增殖实验表明:各组间无显著差别.结论 正确构建了ag85a-卡介苗重组疫苗,ag85a-卡介苗重组疫苗与卡介苗对结核分枝杆菌感染的预防作用基本相同.
目的 構建結覈分枝桿菌ag85a-卡介苗重組疫苗,研究其免疫原性及抗結覈作用,以期穫得結覈病預防性或治療性疫苗.方法 通過基因工程重組技術將結覈分枝桿菌保護性抗原Ag85A的編碼基因與穿梭質粒載體pYUB295重組,採用電穿孔技術導入卡介苗中,應用PCR擴增、PAGE電泳鑒定重組卡介苗.通過ELISA法檢測其免疫小鼠血清中特異性抗體,用MTS法分析其脾淋巴細胞增殖指數.通過觀察ag85a-卡介苗重組疫苗對結覈分枝桿菌感染實驗動物半數死亡時間、一定時間內的死亡率、大體病變、T細胞及B細胞免疫功能等指標評價ag85a-卡介苗重組疫苗對結覈分枝桿菌感染的預防效果.結果 PCR擴增、限製性內切酶酶切、DNA測序鑒定、PAGE電泳錶明成功地構建瞭ag85a基因pYUB295重組質粒,Ag85A蛋白在卡介苗中分泌錶達.重組卡介苗免疫原性試驗錶明:ag85a-卡介苗重組疫苗免疫組小鼠有Ag85A特異性抗體產生, 45天時達到最高水平.脾淋巴細胞增殖試驗錶明刺激指數均達2.0以上,ag85a-卡介苗重組疫苗免疫組小鼠脾淋巴細胞的刺激指數與對照組無明顯區彆.預防試驗錶明:ag85a-卡介苗重組疫苗組、卡介苗組與生理鹽水對照組比都能延長結覈分枝桿菌感染小鼠的半數死亡時間,降低2箇月內的死亡率.結覈分支桿菌攻擊後2箇月,處死小鼠時,小鼠髒器大體病變、髒器培養、抗體檢測結果及淋巴細胞增殖實驗錶明:各組間無顯著差彆.結論 正確構建瞭ag85a-卡介苗重組疫苗,ag85a-卡介苗重組疫苗與卡介苗對結覈分枝桿菌感染的預防作用基本相同.
목적 구건결핵분지간균ag85a-잡개묘중조역묘,연구기면역원성급항결핵작용,이기획득결핵병예방성혹치료성역묘.방법 통과기인공정중조기술장결핵분지간균보호성항원Ag85A적편마기인여천사질립재체pYUB295중조,채용전천공기술도입잡개묘중,응용PCR확증、PAGE전영감정중조잡개묘.통과ELISA법검측기면역소서혈청중특이성항체,용MTS법분석기비림파세포증식지수.통과관찰ag85a-잡개묘중조역묘대결핵분지간균감염실험동물반수사망시간、일정시간내적사망솔、대체병변、T세포급B세포면역공능등지표평개ag85a-잡개묘중조역묘대결핵분지간균감염적예방효과.결과 PCR확증、한제성내절매매절、DNA측서감정、PAGE전영표명성공지구건료ag85a기인pYUB295중조질립,Ag85A단백재잡개묘중분비표체.중조잡개묘면역원성시험표명:ag85a-잡개묘중조역묘면역조소서유Ag85A특이성항체산생, 45천시체도최고수평.비림파세포증식시험표명자격지수균체2.0이상,ag85a-잡개묘중조역묘면역조소서비림파세포적자격지수여대조조무명현구별.예방시험표명:ag85a-잡개묘중조역묘조、잡개묘조여생리염수대조조비도능연장결핵분지간균감염소서적반수사망시간,강저2개월내적사망솔.결핵분지간균공격후2개월,처사소서시,소서장기대체병변、장기배양、항체검측결과급림파세포증식실험표명:각조간무현저차별.결론 정학구건료ag85a-잡개묘중조역묘,ag85a-잡개묘중조역묘여잡개묘대결핵분지간균감염적예방작용기본상동.
