生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
4期
143-146
,共4页
HPV16%E6%E7%宫颈癌%重叠PCR
HPV16%E6%E7%宮頸癌%重疊PCR
HPV16%E6%E7%궁경암%중첩PCR
HPV16型为主的多种HPV病毒可诱发机体发生宫颈癌等疾病,以重叠PCR法人工合成HPV16 E6、E7致癌基因的融合基因,以之为目的基因构建了无选择标记基因(Marker-Free)双元载体,期望转化番茄开发新型宫颈癌治疗性疫苗-转基因植物口服疫苗.通过生物信息学分析HPV16 E6、E7基因,设计并合成密码子优化的靶基因E6-E7融合基因;并在目的基因的上游引入分子佐荆LTB基因,与Kozak序列等表达元件相偶联,以提高目的基因在植物表达系统的表达水平、增强其诱导黏膜免疫的免疫原性.目前已构建pX6-LTB-E7和pX6-LTB-E7-E6两个番茄转化双元载体.采用番茄Marker-Free系统转化和表达HPV16 E6、E7目的基因可以在转化后代中剔除标记基因,从而消除由标记基因可能引起的转基因植物口服疫苗的安全性问题,为HPV转基因植物口服疫苗应用奠定基础.
HPV16型為主的多種HPV病毒可誘髮機體髮生宮頸癌等疾病,以重疊PCR法人工閤成HPV16 E6、E7緻癌基因的融閤基因,以之為目的基因構建瞭無選擇標記基因(Marker-Free)雙元載體,期望轉化番茄開髮新型宮頸癌治療性疫苗-轉基因植物口服疫苗.通過生物信息學分析HPV16 E6、E7基因,設計併閤成密碼子優化的靶基因E6-E7融閤基因;併在目的基因的上遊引入分子佐荊LTB基因,與Kozak序列等錶達元件相偶聯,以提高目的基因在植物錶達繫統的錶達水平、增彊其誘導黏膜免疫的免疫原性.目前已構建pX6-LTB-E7和pX6-LTB-E7-E6兩箇番茄轉化雙元載體.採用番茄Marker-Free繫統轉化和錶達HPV16 E6、E7目的基因可以在轉化後代中剔除標記基因,從而消除由標記基因可能引起的轉基因植物口服疫苗的安全性問題,為HPV轉基因植物口服疫苗應用奠定基礎.
HPV16형위주적다충HPV병독가유발궤체발생궁경암등질병,이중첩PCR법인공합성HPV16 E6、E7치암기인적융합기인,이지위목적기인구건료무선택표기기인(Marker-Free)쌍원재체,기망전화번가개발신형궁경암치료성역묘-전기인식물구복역묘.통과생물신식학분석HPV16 E6、E7기인,설계병합성밀마자우화적파기인E6-E7융합기인;병재목적기인적상유인입분자좌형LTB기인,여Kozak서렬등표체원건상우련,이제고목적기인재식물표체계통적표체수평、증강기유도점막면역적면역원성.목전이구건pX6-LTB-E7화pX6-LTB-E7-E6량개번가전화쌍원재체.채용번가Marker-Free계통전화화표체HPV16 E6、E7목적기인가이재전화후대중척제표기기인,종이소제유표기기인가능인기적전기인식물구복역묘적안전성문제,위HPV전기인식물구복역묘응용전정기출.
