生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2011年
5期
643-646
,共4页
沈毅%韩正滨%张凤伟%顾宁%陈岩%吴琼
瀋毅%韓正濱%張鳳偉%顧寧%陳巖%吳瓊
침의%한정빈%장봉위%고저%진암%오경
Ypel3基因%胚胎发育%小鼠%荧光定量PCR%原位杂交
Ypel3基因%胚胎髮育%小鼠%熒光定量PCR%原位雜交
Ypel3기인%배태발육%소서%형광정량PCR%원위잡교
目的:探讨小鼠胚胎发育过程中Ypel3基因的时空特异性表达与调控,为后续功能研究奠定基础.方法:选取胎龄(E)10.5、12.5、14.5、16.5和18.5 d的小鼠胚胎,利用荧光定量RT-PCR技术研究Ypel3基因mRNA的时序性动态表达谱;采用原位杂交技术观察Ypel3基因mRNA在胚胎发育E11.5和E15.5的空间表达谱;应用定量RT-PCR技术检测表观遗传学修饰对Ypel3基因mRNA表达丰度的影响.结果:定量RT-PCR表明该基因从胚胎发育的早中期开始表达,到出生前表达量呈逐渐升高趋势;原位杂交显示E11.5信号出现在脑和心脏中,E15.5信号在脑、舌、心、肺、胸腺、肝、肾等主要脏器中均有表达;甲基化转移酶抑制剂5-氮胞苷(5-Aza)处理的Neuro-2a(N2a)细胞中,Ypel3的表达水平未产生显著变化,而去乙酰化酶抑制剂4-苯丁酸(4-PBA)处理后该基因表达显著升高,5-Aza和4-PBA联合处理后表达水平进一步升高.结论:Ypel3基因在小鼠胚胎发育各阶段有广泛的表达,提示其具有重要作用,且该基因的表达可能受到组蛋白乙酰化的调控.
目的:探討小鼠胚胎髮育過程中Ypel3基因的時空特異性錶達與調控,為後續功能研究奠定基礎.方法:選取胎齡(E)10.5、12.5、14.5、16.5和18.5 d的小鼠胚胎,利用熒光定量RT-PCR技術研究Ypel3基因mRNA的時序性動態錶達譜;採用原位雜交技術觀察Ypel3基因mRNA在胚胎髮育E11.5和E15.5的空間錶達譜;應用定量RT-PCR技術檢測錶觀遺傳學脩飾對Ypel3基因mRNA錶達豐度的影響.結果:定量RT-PCR錶明該基因從胚胎髮育的早中期開始錶達,到齣生前錶達量呈逐漸升高趨勢;原位雜交顯示E11.5信號齣現在腦和心髒中,E15.5信號在腦、舌、心、肺、胸腺、肝、腎等主要髒器中均有錶達;甲基化轉移酶抑製劑5-氮胞苷(5-Aza)處理的Neuro-2a(N2a)細胞中,Ypel3的錶達水平未產生顯著變化,而去乙酰化酶抑製劑4-苯丁痠(4-PBA)處理後該基因錶達顯著升高,5-Aza和4-PBA聯閤處理後錶達水平進一步升高.結論:Ypel3基因在小鼠胚胎髮育各階段有廣汎的錶達,提示其具有重要作用,且該基因的錶達可能受到組蛋白乙酰化的調控.
목적:탐토소서배태발육과정중Ypel3기인적시공특이성표체여조공,위후속공능연구전정기출.방법:선취태령(E)10.5、12.5、14.5、16.5화18.5 d적소서배태,이용형광정량RT-PCR기술연구Ypel3기인mRNA적시서성동태표체보;채용원위잡교기술관찰Ypel3기인mRNA재배태발육E11.5화E15.5적공간표체보;응용정량RT-PCR기술검측표관유전학수식대Ypel3기인mRNA표체봉도적영향.결과:정량RT-PCR표명해기인종배태발육적조중기개시표체,도출생전표체량정축점승고추세;원위잡교현시E11.5신호출현재뇌화심장중,E15.5신호재뇌、설、심、폐、흉선、간、신등주요장기중균유표체;갑기화전이매억제제5-담포감(5-Aza)처리적Neuro-2a(N2a)세포중,Ypel3적표체수평미산생현저변화,이거을선화매억제제4-분정산(4-PBA)처리후해기인표체현저승고,5-Aza화4-PBA연합처리후표체수평진일보승고.결론:Ypel3기인재소서배태발육각계단유엄범적표체,제시기구유중요작용,차해기인적표체가능수도조단백을선화적조공.