生物医学工程与临床
生物醫學工程與臨床
생물의학공정여림상
BIOMEDICAL ENGINEERING AND CLINICAL MEDICINE
2012年
1期
77-83
,共7页
娄加陶%薛剑%吴传勇%葛歆悦%吴京%姚见儿
婁加陶%薛劍%吳傳勇%葛歆悅%吳京%姚見兒
루가도%설검%오전용%갈흠열%오경%요견인
甲基化%肺癌%多重甲基化特异性PCR
甲基化%肺癌%多重甲基化特異性PCR
갑기화%폐암%다중갑기화특이성PCR
目的 建立10个肺癌相关基因的多重甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)检测方法并运用于临床标本的检测.方法 选取19例肺癌患者病灶组织标本,患者中男性16例,女性3例;平均年龄57.3岁.1例肺部良性病变患者组织标本为男性,年龄52岁.通过质粒构建及甲基化转移酶和亚硫酸盐修饰制备10个基因的甲基化和非甲基化标准品.通过选择甲基化特异性引物来识别甲基化模板,挑选10对甲基化特异性引物并平均分成2组,经最佳聚合酶及最佳退火温度的选择,建立多重甲基化特异性PCR体系,并应用于19例肺癌组织的检测,计算10个基因的甲基化率.结果 在成功构建10个基因的甲基化和非甲基化标准品的基础上,建立了它们的多重甲基化特异性PCR检测方法.临床标本检测结果显示10个肺癌相关基因的甲基化率分别为p16LNk4A92％,H-cadherin 89％,E-cadherin和DAPK 76 ％,TIMP-3 63 ％,RARβ 50％,MGMT 39％,RASSF1A 21％,GSTP1 11％,hMLH1 0％.2次实验结果重复性较好.结论 这种分2组多重甲基化特异性PCR的方法能一次性检测10个基因甲基化状态,可以应用于临床标本的检测.
目的 建立10箇肺癌相關基因的多重甲基化特異性聚閤酶鏈反應(PCR)檢測方法併運用于臨床標本的檢測.方法 選取19例肺癌患者病竈組織標本,患者中男性16例,女性3例;平均年齡57.3歲.1例肺部良性病變患者組織標本為男性,年齡52歲.通過質粒構建及甲基化轉移酶和亞硫痠鹽脩飾製備10箇基因的甲基化和非甲基化標準品.通過選擇甲基化特異性引物來識彆甲基化模闆,挑選10對甲基化特異性引物併平均分成2組,經最佳聚閤酶及最佳退火溫度的選擇,建立多重甲基化特異性PCR體繫,併應用于19例肺癌組織的檢測,計算10箇基因的甲基化率.結果 在成功構建10箇基因的甲基化和非甲基化標準品的基礎上,建立瞭它們的多重甲基化特異性PCR檢測方法.臨床標本檢測結果顯示10箇肺癌相關基因的甲基化率分彆為p16LNk4A92％,H-cadherin 89％,E-cadherin和DAPK 76 ％,TIMP-3 63 ％,RARβ 50％,MGMT 39％,RASSF1A 21％,GSTP1 11％,hMLH1 0％.2次實驗結果重複性較好.結論 這種分2組多重甲基化特異性PCR的方法能一次性檢測10箇基因甲基化狀態,可以應用于臨床標本的檢測.
목적 건립10개폐암상관기인적다중갑기화특이성취합매련반응(PCR)검측방법병운용우림상표본적검측.방법 선취19례폐암환자병조조직표본,환자중남성16례,녀성3례;평균년령57.3세.1례폐부량성병변환자조직표본위남성,년령52세.통과질립구건급갑기화전이매화아류산염수식제비10개기인적갑기화화비갑기화표준품.통과선택갑기화특이성인물래식별갑기화모판,도선10대갑기화특이성인물병평균분성2조,경최가취합매급최가퇴화온도적선택,건립다중갑기화특이성PCR체계,병응용우19례폐암조직적검측,계산10개기인적갑기화솔.결과 재성공구건10개기인적갑기화화비갑기화표준품적기출상,건립료타문적다중갑기화특이성PCR검측방법.림상표본검측결과현시10개폐암상관기인적갑기화솔분별위p16LNk4A92％,H-cadherin 89％,E-cadherin화DAPK 76 ％,TIMP-3 63 ％,RARβ 50％,MGMT 39％,RASSF1A 21％,GSTP1 11％,hMLH1 0％.2차실험결과중복성교호.결론 저충분2조다중갑기화특이성PCR적방법능일차성검측10개기인갑기화상태,가이응용우림상표본적검측.
