山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2011年
47期
1-3
,共3页
缪家文%张海燕%张春华%李芳秋
繆傢文%張海燕%張春華%李芳鞦
무가문%장해연%장춘화%리방추
人精子蛋白17%卵巢肿瘤,卵巢癌%真核表达载体%免疫细胞化学
人精子蛋白17%卵巢腫瘤,卵巢癌%真覈錶達載體%免疫細胞化學
인정자단백17%란소종류,란소암%진핵표체재체%면역세포화학
目的 构建人精子蛋白17(hSp17)基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/hSp17,为其临床应用奠定基础.方法 用PCR方法获取hSp17基因片段,Nhe Ⅰ、Kpn Ⅰ双酶切、粘端连接的方法构建含有hSp17基因的peDNA3.1(+)/hSp17真核表达载体.将该载体行脂质体介导转染卵巢癌细胞HO8910,免疫细胞化学方法检测转染细胞hSp17蛋白表达,G418筛选稳定表达hSp17蛋白的细胞株.结果 酶切和测序结果均证实pcDNA3.1(+)/hSp17重组质粒的构建完全正确.免疫细胞化学方法证实外源性hSp17基因能够在卵巢癌HO8910细胞瞬时表达.经G418连续筛选,得到阳性克隆细胞株,并证实了外源性hSp17基因在卵巢癌HO8910细胞中稳定表达.结论 成功构建了稳定表达外源性hSp17蛋白的卵巢癌细胞株；其可为卵巢癌的免疫治疗奠定基础.
目的 構建人精子蛋白17(hSp17)基因的真覈錶達載體pcDNA3.1(+)/hSp17,為其臨床應用奠定基礎.方法 用PCR方法穫取hSp17基因片段,Nhe Ⅰ、Kpn Ⅰ雙酶切、粘耑連接的方法構建含有hSp17基因的peDNA3.1(+)/hSp17真覈錶達載體.將該載體行脂質體介導轉染卵巢癌細胞HO8910,免疫細胞化學方法檢測轉染細胞hSp17蛋白錶達,G418篩選穩定錶達hSp17蛋白的細胞株.結果 酶切和測序結果均證實pcDNA3.1(+)/hSp17重組質粒的構建完全正確.免疫細胞化學方法證實外源性hSp17基因能夠在卵巢癌HO8910細胞瞬時錶達.經G418連續篩選,得到暘性剋隆細胞株,併證實瞭外源性hSp17基因在卵巢癌HO8910細胞中穩定錶達.結論 成功構建瞭穩定錶達外源性hSp17蛋白的卵巢癌細胞株；其可為卵巢癌的免疫治療奠定基礎.
목적 구건인정자단백17(hSp17)기인적진핵표체재체pcDNA3.1(+)/hSp17,위기림상응용전정기출.방법 용PCR방법획취hSp17기인편단,Nhe Ⅰ、Kpn Ⅰ쌍매절、점단련접적방법구건함유hSp17기인적peDNA3.1(+)/hSp17진핵표체재체.장해재체행지질체개도전염란소암세포HO8910,면역세포화학방법검측전염세포hSp17단백표체,G418사선은정표체hSp17단백적세포주.결과 매절화측서결과균증실pcDNA3.1(+)/hSp17중조질립적구건완전정학.면역세포화학방법증실외원성hSp17기인능구재란소암HO8910세포순시표체.경G418련속사선,득도양성극륭세포주,병증실료외원성hSp17기인재란소암HO8910세포중은정표체.결론 성공구건료은정표체외원성hSp17단백적란소암세포주；기가위란소암적면역치료전정기출.
