重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2012年
14期
1397-1399,1401
,共4页
链球菌,肺炎%膜蛋白质类%中性粒细胞%CXCL8
鏈毬菌,肺炎%膜蛋白質類%中性粒細胞%CXCL8
련구균,폐염%막단백질류%중성립세포%CXCL8
目的 探讨原核表达肺炎链球菌表面蛋白A(PspA)对人类嗜中性粒细胞释放CXCL8的影响.方法 将重组质粒pET-32a(+)/PspA转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导重组菌表达TRx-His-PspA融合蛋白并纯化;通过肠激酶切掉融合蛋白的TRx-His部分,获得PspA蛋白.用PspA蛋白免疫小鼠,获得抗PspA抗体.再将PspA蛋白加入到人类嗜中性粒细胞的培养基中共孵育,检测CXCL8释放水平的差异;最后,用抗PspA抗体检测其对PspA蛋白促人类嗜中性粒细胞释放CXCL8的影响.结果 中性粒细胞细胞内合成和释放到培养基上清液的CXCL8显著增加(P<0.05);而加入了抗PspA抗体后,PspA蛋白刺激人中性粒细胞释放CXCL8的能力明显减弱.结论 PspA可以上调人类嗜中性粒细胞趋化因子CXCL8的合成和释放,揭示了中性粒细胞和肺炎链球菌致病因素之间的关系.
目的 探討原覈錶達肺炎鏈毬菌錶麵蛋白A(PspA)對人類嗜中性粒細胞釋放CXCL8的影響.方法 將重組質粒pET-32a(+)/PspA轉化到大腸埃希菌BL21(DE3)中,經異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷誘導重組菌錶達TRx-His-PspA融閤蛋白併純化;通過腸激酶切掉融閤蛋白的TRx-His部分,穫得PspA蛋白.用PspA蛋白免疫小鼠,穫得抗PspA抗體.再將PspA蛋白加入到人類嗜中性粒細胞的培養基中共孵育,檢測CXCL8釋放水平的差異;最後,用抗PspA抗體檢測其對PspA蛋白促人類嗜中性粒細胞釋放CXCL8的影響.結果 中性粒細胞細胞內閤成和釋放到培養基上清液的CXCL8顯著增加(P<0.05);而加入瞭抗PspA抗體後,PspA蛋白刺激人中性粒細胞釋放CXCL8的能力明顯減弱.結論 PspA可以上調人類嗜中性粒細胞趨化因子CXCL8的閤成和釋放,揭示瞭中性粒細胞和肺炎鏈毬菌緻病因素之間的關繫.
목적 탐토원핵표체폐염련구균표면단백A(PspA)대인류기중성립세포석방CXCL8적영향.방법 장중조질립pET-32a(+)/PspA전화도대장애희균BL21(DE3)중,경이병기-β-D-류대필남반유당감유도중조균표체TRx-His-PspA융합단백병순화;통과장격매절도융합단백적TRx-His부분,획득PspA단백.용PspA단백면역소서,획득항PspA항체.재장PspA단백가입도인류기중성립세포적배양기중공부육,검측CXCL8석방수평적차이;최후,용항PspA항체검측기대PspA단백촉인류기중성립세포석방CXCL8적영향.결과 중성립세포세포내합성화석방도배양기상청액적CXCL8현저증가(P<0.05);이가입료항PspA항체후,PspA단백자격인중성립세포석방CXCL8적능력명현감약.결론 PspA가이상조인류기중성립세포추화인자CXCL8적합성화석방,게시료중성립세포화폐염련구균치병인소지간적관계.