中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
6期
41-46
,共6页
曾思遥%张淑琼%余绍华%唐志玲%陈瑞爱%罗满林
曾思遙%張淑瓊%餘紹華%唐誌玲%陳瑞愛%囉滿林
증사요%장숙경%여소화%당지령%진서애%라만림
猪圆环病毒2型%荧光定量PCR%TaqMan探针%标准曲线
豬圓環病毒2型%熒光定量PCR%TaqMan探針%標準麯線
저원배병독2형%형광정량PCR%TaqMan탐침%표준곡선
本研究以猪圆环病毒2型(PCV2)核衣壳蛋白ORF2基因为目的基因,设计合成特异性引物和探针.PCR扩增得到目的基因,并克隆到pMD18-T载体,筛选得到标准阳性质粒.通过对荧光定量PCR反应条件的优化,建立了PCV2的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法.试验结果表明,该方法特异性强,对猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)等猪常见病原的检测结果均为阴性；与普通PCR方法相比,其敏感性高出100倍,可达100拷贝/μL;对临床样品的检测证明,该方法可有效检测出淋巴结、肺脏等组织中的PCV2.
本研究以豬圓環病毒2型(PCV2)覈衣殼蛋白ORF2基因為目的基因,設計閤成特異性引物和探針.PCR擴增得到目的基因,併剋隆到pMD18-T載體,篩選得到標準暘性質粒.通過對熒光定量PCR反應條件的優化,建立瞭PCV2的TaqMan實時熒光定量PCR檢測方法.試驗結果錶明,該方法特異性彊,對豬偽狂犬病病毒(PRV)、豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)、豬瘟病毒(CSFV)等豬常見病原的檢測結果均為陰性；與普通PCR方法相比,其敏感性高齣100倍,可達100拷貝/μL;對臨床樣品的檢測證明,該方法可有效檢測齣淋巴結、肺髒等組織中的PCV2.
본연구이저원배병독2형(PCV2)핵의각단백ORF2기인위목적기인,설계합성특이성인물화탐침.PCR확증득도목적기인,병극륭도pMD18-T재체,사선득도표준양성질립.통과대형광정량PCR반응조건적우화,건립료PCV2적TaqMan실시형광정량PCR검측방법.시험결과표명,해방법특이성강,대저위광견병병독(PRV)、저번식여호흡종합정병독(PRRSV)、저온병독(CSFV)등저상견병원적검측결과균위음성；여보통PCR방법상비,기민감성고출100배,가체100고패/μL;대림상양품적검측증명,해방법가유효검측출림파결、폐장등조직중적PCV2.
