中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2004年
1期
12-15
,共4页
贾丽丽%俞永新%黄莺%王志伟%岳广智%郑铮%董关木
賈麗麗%俞永新%黃鶯%王誌偉%嶽廣智%鄭錚%董關木
가려려%유영신%황앵%왕지위%악엄지%정쟁%동관목
流行性乙型脑炎%减毒活疫苗%表型%基因稳定性
流行性乙型腦炎%減毒活疫苗%錶型%基因穩定性
류행성을형뇌염%감독활역묘%표형%기인은정성
目的对乙脑减毒活疫苗SA14-14-2株生产毒种及其疫苗病毒滴度、脑内毒力和E区核苷酸序列进行回顾性测定.方法应用乳金黄地鼠肾传代细胞(BHK-21)结晶紫蚀斑法进行病毒滴度的测定,小鼠脑内法检测疫苗脑内毒力.应用RT-PCR方法扩增SA14-14-2生产毒种和疫苗E区的核苷酸,经凝胶层析纯化的PCR产物直接用于测序或克隆到pGEM-T载体中,经酶切和PCR鉴定后进行测序.结果疫苗在-20°C保存长达10多年,疫苗病毒滴度下降不超过0.5 lg;脑内毒力未见毒力回升.病毒蚀斑形态仍保持较SA14野毒株形态小的特性;以不同批次疫苗和生产毒种提取的病毒RNA作为模板进行RT-PCR扩增,扩增的基因片段与预期大小一致;E区基因序列与野毒株差异的8个氨基酸没有一个发生回复突变.结论 SA14-14-2生产毒种及其不同年度不同批次疫苗的生物表型和E区核苷酸的特性是十分稳定的.
目的對乙腦減毒活疫苗SA14-14-2株生產毒種及其疫苗病毒滴度、腦內毒力和E區覈苷痠序列進行迴顧性測定.方法應用乳金黃地鼠腎傳代細胞(BHK-21)結晶紫蝕斑法進行病毒滴度的測定,小鼠腦內法檢測疫苗腦內毒力.應用RT-PCR方法擴增SA14-14-2生產毒種和疫苗E區的覈苷痠,經凝膠層析純化的PCR產物直接用于測序或剋隆到pGEM-T載體中,經酶切和PCR鑒定後進行測序.結果疫苗在-20°C保存長達10多年,疫苗病毒滴度下降不超過0.5 lg;腦內毒力未見毒力迴升.病毒蝕斑形態仍保持較SA14野毒株形態小的特性;以不同批次疫苗和生產毒種提取的病毒RNA作為模闆進行RT-PCR擴增,擴增的基因片段與預期大小一緻;E區基因序列與野毒株差異的8箇氨基痠沒有一箇髮生迴複突變.結論 SA14-14-2生產毒種及其不同年度不同批次疫苗的生物錶型和E區覈苷痠的特性是十分穩定的.
목적대을뇌감독활역묘SA14-14-2주생산독충급기역묘병독적도、뇌내독력화E구핵감산서렬진행회고성측정.방법응용유금황지서신전대세포(BHK-21)결정자식반법진행병독적도적측정,소서뇌내법검측역묘뇌내독력.응용RT-PCR방법확증SA14-14-2생산독충화역묘E구적핵감산,경응효층석순화적PCR산물직접용우측서혹극륭도pGEM-T재체중,경매절화PCR감정후진행측서.결과역묘재-20°C보존장체10다년,역묘병독적도하강불초과0.5 lg;뇌내독력미견독력회승.병독식반형태잉보지교SA14야독주형태소적특성;이불동비차역묘화생산독충제취적병독RNA작위모판진행RT-PCR확증,확증적기인편단여예기대소일치;E구기인서렬여야독주차이적8개안기산몰유일개발생회복돌변.결론 SA14-14-2생산독충급기불동년도불동비차역묘적생물표형화E구핵감산적특성시십분은정적.
