中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2006年
2期
116-120
,共5页
翟建新%王业富%段炼炼%徐争辉%万志香%杨永
翟建新%王業富%段煉煉%徐爭輝%萬誌香%楊永
적건신%왕업부%단련련%서쟁휘%만지향%양영
HIV-1/2%斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)%融合蛋白%P24%GP41
HIV-1/2%斑點金免疫滲濾試驗(DIGFA)%融閤蛋白%P24%GP41
HIV-1/2%반점금면역삼려시험(DIGFA)%융합단백%P24%GP41
应用斑点金免疫渗滤试验(dotimmunogoldfiltration assay,DIGFA)建立了一种同步快速检测四种抗HIV-1/2IgG抗体的HIV诊断试纸.通过基因工程技术在大肠杆菌中表达了5种HIV抗原蛋白片段(P24,GP41,GP36,GP120V3,GP120C).这5种抗原蛋白首先被固定在硝酸纤维素膜上,然后滴加待测血清,其中的病毒抗体通过免疫反应与抗原结合,再加胶体金标记的葡萄球菌蛋白A(SPA),待其渗过膜片后,洗涤,即可形成肉眼可见的红色斑点.用已确证的21份HIV阳性血清(其中包括1份HIV-1标准阳性血清和1份HIV-2标准阳性血清)和30份阴性血清进行了试验,结果表明该快速检测方法与ELISA方法无显著差异.该检测方法不需任何仪器,仅凭肉眼即可判定结果,整个检测过程不超过5分钟.与传统的的ELISA法相比,具有方便快速,成本低廉,应用范围广等优点.同时,此HIV快速诊断试纸可以同步检测并区分针对HIV-1和HIV-2感染的不同检测标志物(抗P24、GP41、GP120和GP36抗体),这对提高快速检测的灵敏度和准确性,以及对判断HIV感染者是否临近或已进入AIDS期有着较高的应用价值.
應用斑點金免疫滲濾試驗(dotimmunogoldfiltration assay,DIGFA)建立瞭一種同步快速檢測四種抗HIV-1/2IgG抗體的HIV診斷試紙.通過基因工程技術在大腸桿菌中錶達瞭5種HIV抗原蛋白片段(P24,GP41,GP36,GP120V3,GP120C).這5種抗原蛋白首先被固定在硝痠纖維素膜上,然後滴加待測血清,其中的病毒抗體通過免疫反應與抗原結閤,再加膠體金標記的葡萄毬菌蛋白A(SPA),待其滲過膜片後,洗滌,即可形成肉眼可見的紅色斑點.用已確證的21份HIV暘性血清(其中包括1份HIV-1標準暘性血清和1份HIV-2標準暘性血清)和30份陰性血清進行瞭試驗,結果錶明該快速檢測方法與ELISA方法無顯著差異.該檢測方法不需任何儀器,僅憑肉眼即可判定結果,整箇檢測過程不超過5分鐘.與傳統的的ELISA法相比,具有方便快速,成本低廉,應用範圍廣等優點.同時,此HIV快速診斷試紙可以同步檢測併區分針對HIV-1和HIV-2感染的不同檢測標誌物(抗P24、GP41、GP120和GP36抗體),這對提高快速檢測的靈敏度和準確性,以及對判斷HIV感染者是否臨近或已進入AIDS期有著較高的應用價值.
응용반점금면역삼려시험(dotimmunogoldfiltration assay,DIGFA)건립료일충동보쾌속검측사충항HIV-1/2IgG항체적HIV진단시지.통과기인공정기술재대장간균중표체료5충HIV항원단백편단(P24,GP41,GP36,GP120V3,GP120C).저5충항원단백수선피고정재초산섬유소막상,연후적가대측혈청,기중적병독항체통과면역반응여항원결합,재가효체금표기적포도구균단백A(SPA),대기삼과막편후,세조,즉가형성육안가견적홍색반점.용이학증적21빈HIV양성혈청(기중포괄1빈HIV-1표준양성혈청화1빈HIV-2표준양성혈청)화30빈음성혈청진행료시험,결과표명해쾌속검측방법여ELISA방법무현저차이.해검측방법불수임하의기,부빙육안즉가판정결과,정개검측과정불초과5분종.여전통적적ELISA법상비,구유방편쾌속,성본저렴,응용범위엄등우점.동시,차HIV쾌속진단시지가이동보검측병구분침대HIV-1화HIV-2감염적불동검측표지물(항P24、GP41、GP120화GP36항체),저대제고쾌속검측적령민도화준학성,이급대판단HIV감염자시부림근혹이진입AIDS기유착교고적응용개치.
