南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2011年
3期
397-402
,共6页
糖原合成酶激酶3β%大肠杆菌表达系统%杆状病毒昆虫细胞表达系统
糖原閤成酶激酶3β%大腸桿菌錶達繫統%桿狀病毒昆蟲細胞錶達繫統
당원합성매격매3β%대장간균표체계통%간상병독곤충세포표체계통
目的 建立一套高纯度、高活性表达糖原合成酶激酶3β的技术.方法 分别采用大肠杆菌和杆状病毒昆虫细胞蛋白表达系统表达糖原合成酶激酶3β,通过His和GST标签两步纯化目的 蛋白,SDS-PAGE观察目的 蛋白的纯度,激酶反应观察目的 蛋白的活性.结果 大肠杆菌表达纯化的糖原合成酶激酶3β占纯化后总蛋白的壁为54%,昆虫细胞表达纯化的糖原合成酶激酶3p占纯化后总蛋白的量为96%;昆虫细胞来源的目的 蛋白比大肠杆菌来源的目的 蛋白活性高-倍左右.结论 相比大肠杆菌表达的糖原合成酶激酶3β,昆虫细胞表达的目的 蛋白具有更高的纯度和活性.
目的 建立一套高純度、高活性錶達糖原閤成酶激酶3β的技術.方法 分彆採用大腸桿菌和桿狀病毒昆蟲細胞蛋白錶達繫統錶達糖原閤成酶激酶3β,通過His和GST標籤兩步純化目的 蛋白,SDS-PAGE觀察目的 蛋白的純度,激酶反應觀察目的 蛋白的活性.結果 大腸桿菌錶達純化的糖原閤成酶激酶3β佔純化後總蛋白的壁為54%,昆蟲細胞錶達純化的糖原閤成酶激酶3p佔純化後總蛋白的量為96%;昆蟲細胞來源的目的 蛋白比大腸桿菌來源的目的 蛋白活性高-倍左右.結論 相比大腸桿菌錶達的糖原閤成酶激酶3β,昆蟲細胞錶達的目的 蛋白具有更高的純度和活性.
목적 건립일투고순도、고활성표체당원합성매격매3β적기술.방법 분별채용대장간균화간상병독곤충세포단백표체계통표체당원합성매격매3β,통과His화GST표첨량보순화목적 단백,SDS-PAGE관찰목적 단백적순도,격매반응관찰목적 단백적활성.결과 대장간균표체순화적당원합성매격매3β점순화후총단백적벽위54%,곤충세포표체순화적당원합성매격매3p점순화후총단백적량위96%;곤충세포래원적목적 단백비대장간균래원적목적 단백활성고-배좌우.결론 상비대장간균표체적당원합성매격매3β,곤충세포표체적목적 단백구유경고적순도화활성.
