中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
23期
4247-4250
,共4页
张浩%康焱%马元琛%张紫机%黄保丁%廖威明
張浩%康焱%馬元琛%張紫機%黃保丁%廖威明
장호%강염%마원침%장자궤%황보정%료위명
成骨分化%miRNA%脂肪来源干细胞%基因芯片%表达模式
成骨分化%miRNA%脂肪來源榦細胞%基因芯片%錶達模式
성골분화%miRNA%지방래원간세포%기인심편%표체모식
背景:miRNA在细胞分化等众多生理病理过程中起重要调控作用,可调节脂肪来源干细胞成骨分化.目的:筛选成骨分化相关miRNA,分析miRNA在脂肪来源干细胞成骨分化过程中的表达模式.方法:从皮下脂肪组织中分离、培养人脂肪来源干细胞.应用基因芯片技术筛选脂肪来源干细胞成骨诱导前后表达差异显著的miRNA,采用RT-PCR技术检测所筛选的miRNA在成骨诱导第7,14,21天上调/下调的相对表达强度,以ELISA试剂盒检测相应时间点成骨相关蛋白的表达情况.结果与结论:①倒置显微镜下观察,传3代后可获得均一性较高的脂肪来源干细胞,一定诱导条件下具有成骨、成脂、成软骨分化能力.②基因芯片技术筛选出成骨分化前后表达差异变化明显的9个miRNA,其中5个上调,4个下调.③成骨诱导第7天,miR-106a表达上调1.58倍(P<0.05).第14天时,9个miRNA均表达上调.第21天时,5个miRNA表达上调,4个表达下调.④成骨相关蛋白骨钙素、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原及骨唾液酸蛋白的质量浓度在诱导成骨分化第7天即明显升高,第14天达到峰值,第21天略有下降.
揹景:miRNA在細胞分化等衆多生理病理過程中起重要調控作用,可調節脂肪來源榦細胞成骨分化.目的:篩選成骨分化相關miRNA,分析miRNA在脂肪來源榦細胞成骨分化過程中的錶達模式.方法:從皮下脂肪組織中分離、培養人脂肪來源榦細胞.應用基因芯片技術篩選脂肪來源榦細胞成骨誘導前後錶達差異顯著的miRNA,採用RT-PCR技術檢測所篩選的miRNA在成骨誘導第7,14,21天上調/下調的相對錶達彊度,以ELISA試劑盒檢測相應時間點成骨相關蛋白的錶達情況.結果與結論:①倒置顯微鏡下觀察,傳3代後可穫得均一性較高的脂肪來源榦細胞,一定誘導條件下具有成骨、成脂、成軟骨分化能力.②基因芯片技術篩選齣成骨分化前後錶達差異變化明顯的9箇miRNA,其中5箇上調,4箇下調.③成骨誘導第7天,miR-106a錶達上調1.58倍(P<0.05).第14天時,9箇miRNA均錶達上調.第21天時,5箇miRNA錶達上調,4箇錶達下調.④成骨相關蛋白骨鈣素、堿性燐痠酶、Ⅰ型膠原及骨唾液痠蛋白的質量濃度在誘導成骨分化第7天即明顯升高,第14天達到峰值,第21天略有下降.
배경:miRNA재세포분화등음다생리병리과정중기중요조공작용,가조절지방래원간세포성골분화.목적:사선성골분화상관miRNA,분석miRNA재지방래원간세포성골분화과정중적표체모식.방법:종피하지방조직중분리、배양인지방래원간세포.응용기인심편기술사선지방래원간세포성골유도전후표체차이현저적miRNA,채용RT-PCR기술검측소사선적miRNA재성골유도제7,14,21천상조/하조적상대표체강도,이ELISA시제합검측상응시간점성골상관단백적표체정황.결과여결론:①도치현미경하관찰,전3대후가획득균일성교고적지방래원간세포,일정유도조건하구유성골、성지、성연골분화능력.②기인심편기술사선출성골분화전후표체차이변화명현적9개miRNA,기중5개상조,4개하조.③성골유도제7천,miR-106a표체상조1.58배(P<0.05).제14천시,9개miRNA균표체상조.제21천시,5개miRNA표체상조,4개표체하조.④성골상관단백골개소、감성린산매、Ⅰ형효원급골타액산단백적질량농도재유도성골분화제7천즉명현승고,제14천체도봉치,제21천략유하강.
