生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2011年
6期
1-4
,共4页
金色链霉菌%ctcF%基因敲除%分子遗传工程
金色鏈黴菌%ctcF%基因敲除%分子遺傳工程
금색련매균%ctcF%기인고제%분자유전공정
目的:建立金色链霉菌基因敲除体系,敲除金色链霉菌J13中的ctcF基因,研究工程菌的代谢变化.方法:采用基因置换和框内缺失技术,对ctcF基因进行敲除.结果:利用接合转移的方法,将质粒pFD109导入到金色链霉菌J13中,经抗性筛选及PCR验证获得ctcF基因置换菌株金色链霉菌A1 - 20；将质粒pFD111经接合转移导入到A1 -20中,获得ctcF基因框内缺失菌株金色链霉菌K2-46；以上工程菌的发酵组分经HPLC分析,发现金霉素发酵单位显著降低.结论:获得的接合子发生双交换的概率可达18％以上,建立及验证了金色链霉菌基因敲除体系的实用性和可操作性,并初步推测ctcF为金霉素生物合成中的调控基因.
目的:建立金色鏈黴菌基因敲除體繫,敲除金色鏈黴菌J13中的ctcF基因,研究工程菌的代謝變化.方法:採用基因置換和框內缺失技術,對ctcF基因進行敲除.結果:利用接閤轉移的方法,將質粒pFD109導入到金色鏈黴菌J13中,經抗性篩選及PCR驗證穫得ctcF基因置換菌株金色鏈黴菌A1 - 20；將質粒pFD111經接閤轉移導入到A1 -20中,穫得ctcF基因框內缺失菌株金色鏈黴菌K2-46；以上工程菌的髮酵組分經HPLC分析,髮現金黴素髮酵單位顯著降低.結論:穫得的接閤子髮生雙交換的概率可達18％以上,建立及驗證瞭金色鏈黴菌基因敲除體繫的實用性和可操作性,併初步推測ctcF為金黴素生物閤成中的調控基因.
목적:건립금색련매균기인고제체계,고제금색련매균J13중적ctcF기인,연구공정균적대사변화.방법:채용기인치환화광내결실기술,대ctcF기인진행고제.결과:이용접합전이적방법,장질립pFD109도입도금색련매균J13중,경항성사선급PCR험증획득ctcF기인치환균주금색련매균A1 - 20；장질립pFD111경접합전이도입도A1 -20중,획득ctcF기인광내결실균주금색련매균K2-46；이상공정균적발효조분경HPLC분석,발현금매소발효단위현저강저.결론:획득적접합자발생쌍교환적개솔가체18％이상,건립급험증료금색련매균기인고제체계적실용성화가조작성,병초보추측ctcF위금매소생물합성중적조공기인.
