CAJ | 학술논문

结合树突状细胞(DC)生物学特性,探讨抗P-选择素lectin-EGF功能域单抗(PsL-EGFmAb)对体外培养人DC成熟和功能干预调节的作用.通过SCF,GM-CSF,TGF-β1,Flt-3L及TNF-α体外培养体系,从脐血CD34+造血干细胞中诱导扩增获得DC,并于细胞成熟过程中用PsL-EGFmAb及辅以IL-10作为对照进行干预.分别观察和检测DC形态学及细胞活力,细胞表面分子HLA-DR,CD1a,CD11c,CD54,CD83,CD80,CD86,CD209(DC-SIGN)及CD62P,E, L(P-、E-、L-选择素)表达,细胞内活性氧(ROS)水平,及IL-12p35,p40 mRNA与NF-κBP50,P65 mRNA表达,培养上清液中IL-12p70分泌含量,以及DC体外对T淋巴细胞刺激能力,以此分析PsL-EGFmAb对DC成熟与功能的干预状况.结果显示,未成熟DC高表达属模式识别受体的C型凝集素DC-SIGN外,且胞内蓄积适量ROS,具备了细胞吞噬能力.成熟DC除仍高表达DC-SIGN,伴随细胞内NF-κB基因明显表达,其表面黏附共刺激分子CD11c,CD83,CD80,CD86表达上调,且细胞因子IL-12合成分泌增加,并具明显的体外刺激T淋巴细胞增殖能力,符合于抗原提呈细胞特征.此外,未成熟和成熟DC基本不表达P-,E-选择素,而分别高表达和低表达L-选择素.进一步发现,PsL-EGFmAb较对照IL-10对DC表面DC-SIGN表达有抑制作用;也能抑制细胞内NF-κB基因表达,并相应抑制或下调DC黏附共刺激分子CD11c,CD83,CD80,CD86及HLA-DR表达,抑制IL-12基因转录及其合成分泌,以及抑制DC体外刺激T细胞增殖的能力.上述结果表明,PsL-EGFmAb对DC分化成熟及功能具有抑制作用,提示此作用与其抑制作为DC模式识别受体及功能分子DC-SIGN有关,并可能是通过影响NF-κB信号途径起作用.
결합수돌상세포(DC)생물학특성,탐토항P-선택소lectin-EGF공능역단항(PsL-EGFmAb)대체외배양인DC성숙화공능간예조절적작용.통과SCF,GM-CSF,TGF-β1,Flt-3L급TNF-α체외배양체계,종제혈CD34+조혈간세포중유도확증획득DC,병우세포성숙과정중용PsL-EGFmAb급보이IL-10작위대조진행간예.분별관찰화검측DC형태학급세포활력,세포표면분자HLA-DR,CD1a,CD11c,CD54,CD83,CD80,CD86,CD209(DC-SIGN)급CD62P,E, L(P-、E-、L-선택소)표체,세포내활성양(ROS)수평,급IL-12p35,p40 mRNA여NF-κBP50,P65 mRNA표체,배양상청액중IL-12p70분비함량,이급DC체외대T림파세포자격능력,이차분석PsL-EGFmAb대DC성숙여공능적간예상황.결과현시,미성숙DC고표체속모식식별수체적C형응집소DC-SIGN외,차포내축적괄량ROS,구비료세포탄서능력.성숙DC제잉고표체DC-SIGN,반수세포내NF-κB기인명현표체,기표면점부공자격분자CD11c,CD83,CD80,CD86표체상조,차세포인자IL-12합성분비증가,병구명현적체외자격T림파세포증식능력,부합우항원제정세포특정.차외,미성숙화성숙DC기본불표체P-,E-선택소,이분별고표체화저표체L-선택소.진일보발현,PsL-EGFmAb교대조IL-10대DC표면DC-SIGN표체유억제작용;야능억제세포내NF-κB기인표체,병상응억제혹하조DC점부공자격분자CD11c,CD83,CD80,CD86급HLA-DR표체,억제IL-12기인전록급기합성분비,이급억제DC체외자격T세포증식적능력.상술결과표명,PsL-EGFmAb대DC분화성숙급공능구유억제작용,제시차작용여기억제작위DC모식식별수체급공능분자DC-SIGN유관,병가능시통과영향NF-κB신호도경기작용.