中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2007年
4期
507-510
,共4页
李自青%许崇波%赵志军%许崇利%曾瑾
李自青%許崇波%趙誌軍%許崇利%曾瑾
리자청%허숭파%조지군%허숭리%증근
CPA-LTB%基因融合%基因表达
CPA-LTB%基因融閤%基因錶達
CPA-LTB%기인융합%기인표체
利用PCR技术,从A型产气荚膜梭菌染色体和pEWD299中分别扩增出α毒素(CPA)基因和LTB基因,通过分离、纯化、内切酶酶切、连接和转化,构建了含CPA-LTB融合基因表达质粒的重组菌株BL21(DE3)(pCPA-LTB).经酶切鉴定和核苷酸序列测定证实,构建的重组质粒pET-CPA含有CPA-LTB融合基因,其基因序列和阅读框架均正确.经EISA检测和SDS-PAGE分析,重组菌株表达的CPA-LTB融合蛋白能够被α、LT毒素抗体所识别.重组菌株BL21(DE3)(pCPA-LTB)经IPTG诱导后,融合蛋白CPA-LTB的表达量占菌体总蛋白相对含量的12.5%.
利用PCR技術,從A型產氣莢膜梭菌染色體和pEWD299中分彆擴增齣α毒素(CPA)基因和LTB基因,通過分離、純化、內切酶酶切、連接和轉化,構建瞭含CPA-LTB融閤基因錶達質粒的重組菌株BL21(DE3)(pCPA-LTB).經酶切鑒定和覈苷痠序列測定證實,構建的重組質粒pET-CPA含有CPA-LTB融閤基因,其基因序列和閱讀框架均正確.經EISA檢測和SDS-PAGE分析,重組菌株錶達的CPA-LTB融閤蛋白能夠被α、LT毒素抗體所識彆.重組菌株BL21(DE3)(pCPA-LTB)經IPTG誘導後,融閤蛋白CPA-LTB的錶達量佔菌體總蛋白相對含量的12.5%.
이용PCR기술,종A형산기협막사균염색체화pEWD299중분별확증출α독소(CPA)기인화LTB기인,통과분리、순화、내절매매절、련접화전화,구건료함CPA-LTB융합기인표체질립적중조균주BL21(DE3)(pCPA-LTB).경매절감정화핵감산서렬측정증실,구건적중조질립pET-CPA함유CPA-LTB융합기인,기기인서렬화열독광가균정학.경EISA검측화SDS-PAGE분석,중조균주표체적CPA-LTB융합단백능구피α、LT독소항체소식별.중조균주BL21(DE3)(pCPA-LTB)경IPTG유도후,융합단백CPA-LTB적표체량점균체총단백상대함량적12.5%.
