CAJ | 학술논문

目的:观察芪丹颗粒对博莱霉素致肺纤维化鼠的Ⅰ型前胶原和Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响,探讨其作用机制.方法:实验于2004-10/2006-10在山东省医学科学院基础所病理实验室完成.实验材料:清洁级雄性SD大鼠.160只,体质量180～210 g.氢化可的松琥珀酸钠50 mg/支;芪丹(颗粒剂)是由黄芪、丹参、川芎等中草药加工提纯后的粗提取物制成的颗粒剂,10 g/包(1 g干粉相当于原生药8 g).实验分组:160只SD大鼠按随机区组设计分为正常组20只、模型组40只、芪丹颗粒剂50只、氢化可的松50 N.实验干预:正常组20只气管内灌注和灌胃均用生理盐水.其余大鼠经气管内一次性灌注博莱霉素A5按0.25 mL.左右(5 mg/kg体质量)诱导大鼠肺间质纤维化.随机取40只为模型组.取芪丹颗粒剂组和氢化可地松组大鼠各30只,分别从造模后第2天灌注芪丹颗粒剂(3125mg/kg)和腹腔注射氢化可的松(25mg/kg),药物干预后第7,14,28天麻醉下处死动物.两组各余20只分别从造模14 d后灌注芪丹颗粒剂和腹腔注射氢化可的松(用量同前),于第28、42天分别处死动物.实验评估:用苏木精-伊红评价肺组织病理学变化和原位杂交方法检测各组大鼠肺I型和Ⅲ型前胶原mRNA表达.结果:160只大鼠全部进入结果分析.①大鼠肺脏大体标本观察:对照组肺组织各观察时间点无明显改变,模型组肺组织表面凸凹不平,部分肺叶体积缩小,表面见灰白色结节.氢化可的松组与模型组相似.芪丹颗粒剂组见部分肺叶表面不光滑及大小不等结节.②肺组织病理学观察:模型组7 d肺泡腔内大量巨噬细胞淋巴细胞中性粒细胞浸润,肺间质成纤维细胞增殖,28 d肺泡结构破坏肺泡内见大量胶原纤维和成纤维细胞.芪丹颗粒剂组肺泡炎及肺纤维化程度均明显轻于模型组和氢化可的松组(P＜0.05).③肺间质纤维化形成中Ⅰ型、Ⅲ型前胶原mRNA表达:原位杂交显示两种前胶原mRNA表达呈动态变化,早期肺泡炎以Ⅲ型前胶原mRNA大量增生为主,晚期纤维化期以Ⅰ型前胶原mRNA增生为主.芪丹颗粒剂组m型前胶原mRNA的表达在第14天处于最高,至28 d仍维持较高的水平,芪丹颗粒剂组Ⅲ型前胶原mRNA的表达高于模型组和氢化可的松组(P＜0.05).28 d,Ⅰ型前胶原mRNA的表达在第二天给药芪丹颗粒剂组和氢化可地松组及第14天给药芪丹颗粒剂组和氢化可的松组组间差异均有显著性(P＜0.05).结论:大鼠肺纤维化的早期以Ⅲ型前胶原mRNA的表达为主,晚期纤维化期以Ⅰ型前胶原mRNA的大量表达为主.芪丹颗粒可减轻博莱霉素诱导的大鼠肺泡炎及肺纤维化的程度,其机制可能通过影响了Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA的代谢和表达,从而减慢肺间质纤维化的进程.芪丹颗粒对肺间质纤维化有治疗作用,且优于氢化可的松. 目的:觀察芪丹顆粒對博萊黴素緻肺纖維化鼠的Ⅰ型前膠原和Ⅲ型前膠原mRNA錶達的影響,探討其作用機製.方法:實驗于2004-10/2006-10在山東省醫學科學院基礎所病理實驗室完成.實驗材料:清潔級雄性SD大鼠.160隻,體質量180～210 g.氫化可的鬆琥珀痠鈉50 mg/支;芪丹(顆粒劑)是由黃芪、丹參、川芎等中草藥加工提純後的粗提取物製成的顆粒劑,10 g/包(1 g榦粉相噹于原生藥8 g).實驗分組:160隻SD大鼠按隨機區組設計分為正常組20隻、模型組40隻、芪丹顆粒劑50隻、氫化可的鬆50 N.實驗榦預:正常組20隻氣管內灌註和灌胃均用生理鹽水.其餘大鼠經氣管內一次性灌註博萊黴素A5按0.25 mL.左右(5 mg/kg體質量)誘導大鼠肺間質纖維化.隨機取40隻為模型組.取芪丹顆粒劑組和氫化可地鬆組大鼠各30隻,分彆從造模後第2天灌註芪丹顆粒劑(3125mg/kg)和腹腔註射氫化可的鬆(25mg/kg),藥物榦預後第7,14,28天痳醉下處死動物.兩組各餘20隻分彆從造模14 d後灌註芪丹顆粒劑和腹腔註射氫化可的鬆(用量同前),于第28、42天分彆處死動物.實驗評估:用囌木精-伊紅評價肺組織病理學變化和原位雜交方法檢測各組大鼠肺I型和Ⅲ型前膠原mRNA錶達.結果:160隻大鼠全部進入結果分析.①大鼠肺髒大體標本觀察:對照組肺組織各觀察時間點無明顯改變,模型組肺組織錶麵凸凹不平,部分肺葉體積縮小,錶麵見灰白色結節.氫化可的鬆組與模型組相似.芪丹顆粒劑組見部分肺葉錶麵不光滑及大小不等結節.②肺組織病理學觀察:模型組7 d肺泡腔內大量巨噬細胞淋巴細胞中性粒細胞浸潤,肺間質成纖維細胞增殖,28 d肺泡結構破壞肺泡內見大量膠原纖維和成纖維細胞.芪丹顆粒劑組肺泡炎及肺纖維化程度均明顯輕于模型組和氫化可的鬆組(P＜0.05).③肺間質纖維化形成中Ⅰ型、Ⅲ型前膠原mRNA錶達:原位雜交顯示兩種前膠原mRNA錶達呈動態變化,早期肺泡炎以Ⅲ型前膠原mRNA大量增生為主,晚期纖維化期以Ⅰ型前膠原mRNA增生為主.芪丹顆粒劑組m型前膠原mRNA的錶達在第14天處于最高,至28 d仍維持較高的水平,芪丹顆粒劑組Ⅲ型前膠原mRNA的錶達高于模型組和氫化可的鬆組(P＜0.05).28 d,Ⅰ型前膠原mRNA的錶達在第二天給藥芪丹顆粒劑組和氫化可地鬆組及第14天給藥芪丹顆粒劑組和氫化可的鬆組組間差異均有顯著性(P＜0.05).結論:大鼠肺纖維化的早期以Ⅲ型前膠原mRNA的錶達為主,晚期纖維化期以Ⅰ型前膠原mRNA的大量錶達為主.芪丹顆粒可減輕博萊黴素誘導的大鼠肺泡炎及肺纖維化的程度,其機製可能通過影響瞭Ⅰ型和Ⅲ型前膠原mRNA的代謝和錶達,從而減慢肺間質纖維化的進程.芪丹顆粒對肺間質纖維化有治療作用,且優于氫化可的鬆.
목적:관찰기단과립대박래매소치폐섬유화서적Ⅰ형전효원화Ⅲ형전효원mRNA표체적영향,탐토기작용궤제.방법:실험우2004-10/2006-10재산동성의학과학원기출소병리실험실완성.실험재료:청길급웅성SD대서.160지,체질량180～210 g.경화가적송호박산납50 mg/지;기단(과립제)시유황기、단삼、천궁등중초약가공제순후적조제취물제성적과립제,10 g/포(1 g간분상당우원생약8 g).실험분조:160지SD대서안수궤구조설계분위정상조20지、모형조40지、기단과립제50지、경화가적송50 N.실험간예:정상조20지기관내관주화관위균용생리염수.기여대서경기관내일차성관주박래매소A5안0.25 mL.좌우(5 mg/kg체질량)유도대서폐간질섬유화.수궤취40지위모형조.취기단과립제조화경화가지송조대서각30지,분별종조모후제2천관주기단과립제(3125mg/kg)화복강주사경화가적송(25mg/kg),약물간예후제7,14,28천마취하처사동물.량조각여20지분별종조모14 d후관주기단과립제화복강주사경화가적송(용량동전),우제28、42천분별처사동물.실험평고:용소목정-이홍평개폐조직병이학변화화원위잡교방법검측각조대서폐I형화Ⅲ형전효원mRNA표체.결과:160지대서전부진입결과분석.①대서폐장대체표본관찰:대조조폐조직각관찰시간점무명현개변,모형조폐조직표면철요불평,부분폐협체적축소,표면견회백색결절.경화가적송조여모형조상사.기단과립제조견부분폐협표면불광활급대소불등결절.②폐조직병이학관찰:모형조7 d폐포강내대량거서세포림파세포중성립세포침윤,폐간질성섬유세포증식,28 d폐포결구파배폐포내견대량효원섬유화성섬유세포.기단과립제조폐포염급폐섬유화정도균명현경우모형조화경화가적송조(P＜0.05).③폐간질섬유화형성중Ⅰ형、Ⅲ형전효원mRNA표체:원위잡교현시량충전효원mRNA표체정동태변화,조기폐포염이Ⅲ형전효원mRNA대량증생위주,만기섬유화기이Ⅰ형전효원mRNA증생위주.기단과립제조m형전효원mRNA적표체재제14천처우최고,지28 d잉유지교고적수평,기단과립제조Ⅲ형전효원mRNA적표체고우모형조화경화가적송조(P＜0.05).28 d,Ⅰ형전효원mRNA적표체재제이천급약기단과립제조화경화가지송조급제14천급약기단과립제조화경화가적송조조간차이균유현저성(P＜0.05).결론:대서폐섬유화적조기이Ⅲ형전효원mRNA적표체위주,만기섬유화기이Ⅰ형전효원mRNA적대량표체위주.기단과립가감경박래매소유도적대서폐포염급폐섬유화적정도,기궤제가능통과영향료Ⅰ형화Ⅲ형전효원mRNA적대사화표체,종이감만폐간질섬유화적진정.기단과립대폐간질섬유화유치료작용,차우우경화가적송.