解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2008年
2期
197-201
,共5页
施琼%王箭%袁泰先%翁亚光%王应雄%徐远久%蔡燕%蒋洪彦
施瓊%王箭%袁泰先%翁亞光%王應雄%徐遠久%蔡燕%蔣洪彥
시경%왕전%원태선%옹아광%왕응웅%서원구%채연%장홍언
有丝分裂关卡基因%RNA干扰%细胞增殖%染色体数目异常%免疫印迹法
有絲分裂關卡基因%RNA榦擾%細胞增殖%染色體數目異常%免疫印跡法
유사분렬관잡기인%RNA간우%세포증식%염색체수목이상%면역인적법
目的 讨染色体数目异常自然流产胚胎中有丝分裂关卡蛋白(hsMAD2)基因的功能.方法 分别用定量PCR和Westarn blotting在mRNA和蛋白水平检测染色体数目异常(实验组)和正常(对照组)的自然流产胚胎组织中目的 基因的表达;构建针对hsMAD2基因的shRNA表达载体,抑制胚胎细胞内源性hsMAD2基因的表达.用Western blotting和定量PCR方法评价shRNA的干扰效果;用MTT法测定细胞增殖率;流式细胞术检测细胞周期.结果 hsMAD2蛋白在实验组中的表达显著低于对照组.shRNA的重组质粒表达载体能明显抑制胚胎细胞中hsMAD2基因的表达.胚胎细胞转染有效干扰质粒48 h后,细胞增殖抑制率达58%.有效干扰质粒引起G0/G1期和S期细胞的明显降低,G2/M期细胞增多. 结论 hsMAD2基因表达下调可能在染色体数目异常的自然流产胚胎发生中起着很重要的作用,为寻找可靠的临床检测指标奠定了基础.
目的 討染色體數目異常自然流產胚胎中有絲分裂關卡蛋白(hsMAD2)基因的功能.方法 分彆用定量PCR和Westarn blotting在mRNA和蛋白水平檢測染色體數目異常(實驗組)和正常(對照組)的自然流產胚胎組織中目的 基因的錶達;構建針對hsMAD2基因的shRNA錶達載體,抑製胚胎細胞內源性hsMAD2基因的錶達.用Western blotting和定量PCR方法評價shRNA的榦擾效果;用MTT法測定細胞增殖率;流式細胞術檢測細胞週期.結果 hsMAD2蛋白在實驗組中的錶達顯著低于對照組.shRNA的重組質粒錶達載體能明顯抑製胚胎細胞中hsMAD2基因的錶達.胚胎細胞轉染有效榦擾質粒48 h後,細胞增殖抑製率達58%.有效榦擾質粒引起G0/G1期和S期細胞的明顯降低,G2/M期細胞增多. 結論 hsMAD2基因錶達下調可能在染色體數目異常的自然流產胚胎髮生中起著很重要的作用,為尋找可靠的臨床檢測指標奠定瞭基礎.
목적 토염색체수목이상자연유산배태중유사분렬관잡단백(hsMAD2)기인적공능.방법 분별용정량PCR화Westarn blotting재mRNA화단백수평검측염색체수목이상(실험조)화정상(대조조)적자연유산배태조직중목적 기인적표체;구건침대hsMAD2기인적shRNA표체재체,억제배태세포내원성hsMAD2기인적표체.용Western blotting화정량PCR방법평개shRNA적간우효과;용MTT법측정세포증식솔;류식세포술검측세포주기.결과 hsMAD2단백재실험조중적표체현저저우대조조.shRNA적중조질립표체재체능명현억제배태세포중hsMAD2기인적표체.배태세포전염유효간우질립48 h후,세포증식억제솔체58%.유효간우질립인기G0/G1기화S기세포적명현강저,G2/M기세포증다. 결론 hsMAD2기인표체하조가능재염색체수목이상적자연유산배태발생중기착흔중요적작용,위심조가고적림상검측지표전정료기출.
