中华临床医师杂志（电子版）
中華臨床醫師雜誌（電子版）
중화림상의사잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF CLINICIANS(ELECTRONIC VERSION)
2010年
11期
2136-2141
,共6页
潘思年%张成喜%李燕虹%马华梅%朱顺叶%杜敏联
潘思年%張成喜%李燕虹%馬華梅%硃順葉%杜敏聯
반사년%장성희%리연홍%마화매%주순협%두민련
软骨细胞%细胞培养技术%生长激素%生长板
軟骨細胞%細胞培養技術%生長激素%生長闆
연골세포%세포배양기술%생장격소%생장판
目的 研究生长激素(GH)对促性腺激素释放激素拟似物(GnRHa)处理后的离体青春期大鼠生长板软骨细胞增殖和表型的影响.方法 采用两步酶消化法分离培养经GnRHa 处理后的5 ～8 只雌鼠胫骨生长板软骨细胞,用四氮甲基唑蓝(MTT)、流式细胞仪测定细胞周期以及免疫组化法测定增殖细胞核抗原(PCNA)和胶原Ⅱ(ColⅡ)的表达,观察不同作用时间和不同剂量的GH 对软骨细胞增殖和表型的影响.结果 GH 能促进体外培养GnRHa 处理后的青春期大鼠生长板软骨细胞的增殖,并存在一定的时效和量效关系.GH 作用后第1 天、第2 天、第3 天、第4 天、第5 天、第6天组与对照组比较有统计学意义(P ＜0.05),并以第4 天时的促增殖效应最强.GH 浓度低时(10 ng/ml, 20 ng/ml)促增殖效应不明显(P ＞0.05),而浓度增加至50 ng/ml 时促增殖效应开始显现(P ＜0.05),至100 ng/ml 时促增殖效应最明显.GH 亦能促进ColⅡ的表达,以GH 作用后第4 天,浓度为100 ng/ml 时ColⅡ的表达最强.结论 GH 能以直接作用的方式促进体外培养的经GnRHa 处理后的大鼠胫骨生长板软骨细胞的增殖和ColⅡ的表达,GH 促增殖的剂量与临床应用剂量存在一致性,为GH 克服GnRHa 使用过程中所造成的生长减速提供了实验理论依据.
目的 研究生長激素(GH)對促性腺激素釋放激素擬似物(GnRHa)處理後的離體青春期大鼠生長闆軟骨細胞增殖和錶型的影響.方法 採用兩步酶消化法分離培養經GnRHa 處理後的5 ～8 隻雌鼠脛骨生長闆軟骨細胞,用四氮甲基唑藍(MTT)、流式細胞儀測定細胞週期以及免疫組化法測定增殖細胞覈抗原(PCNA)和膠原Ⅱ(ColⅡ)的錶達,觀察不同作用時間和不同劑量的GH 對軟骨細胞增殖和錶型的影響.結果 GH 能促進體外培養GnRHa 處理後的青春期大鼠生長闆軟骨細胞的增殖,併存在一定的時效和量效關繫.GH 作用後第1 天、第2 天、第3 天、第4 天、第5 天、第6天組與對照組比較有統計學意義(P ＜0.05),併以第4 天時的促增殖效應最彊.GH 濃度低時(10 ng/ml, 20 ng/ml)促增殖效應不明顯(P ＞0.05),而濃度增加至50 ng/ml 時促增殖效應開始顯現(P ＜0.05),至100 ng/ml 時促增殖效應最明顯.GH 亦能促進ColⅡ的錶達,以GH 作用後第4 天,濃度為100 ng/ml 時ColⅡ的錶達最彊.結論 GH 能以直接作用的方式促進體外培養的經GnRHa 處理後的大鼠脛骨生長闆軟骨細胞的增殖和ColⅡ的錶達,GH 促增殖的劑量與臨床應用劑量存在一緻性,為GH 剋服GnRHa 使用過程中所造成的生長減速提供瞭實驗理論依據.
목적 연구생장격소(GH)대촉성선격소석방격소의사물(GnRHa)처리후적리체청춘기대서생장판연골세포증식화표형적영향.방법 채용량보매소화법분리배양경GnRHa 처리후적5 ～8 지자서경골생장판연골세포,용사담갑기서람(MTT)、류식세포의측정세포주기이급면역조화법측정증식세포핵항원(PCNA)화효원Ⅱ(ColⅡ)적표체,관찰불동작용시간화불동제량적GH 대연골세포증식화표형적영향.결과 GH 능촉진체외배양GnRHa 처리후적청춘기대서생장판연골세포적증식,병존재일정적시효화량효관계.GH 작용후제1 천、제2 천、제3 천、제4 천、제5 천、제6천조여대조조비교유통계학의의(P ＜0.05),병이제4 천시적촉증식효응최강.GH 농도저시(10 ng/ml, 20 ng/ml)촉증식효응불명현(P ＞0.05),이농도증가지50 ng/ml 시촉증식효응개시현현(P ＜0.05),지100 ng/ml 시촉증식효응최명현.GH 역능촉진ColⅡ적표체,이GH 작용후제4 천,농도위100 ng/ml 시ColⅡ적표체최강.결론 GH 능이직접작용적방식촉진체외배양적경GnRHa 처리후적대서경골생장판연골세포적증식화ColⅡ적표체,GH 촉증식적제량여림상응용제량존재일치성,위GH 극복GnRHa 사용과정중소조성적생장감속제공료실험이론의거.
