中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2011年
8期
89-92
,共4页
NDV%HN基因%克隆%功能结构域%原核表达
NDV%HN基因%剋隆%功能結構域%原覈錶達
NDV%HN기인%극륭%공능결구역%원핵표체
本研究对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)分离株sc05的HN基因进行了克隆、序列测定,在此基础上将其C端功能结构域76-571 aa片段亚克隆到pET32a(+)表达载体上,构建重组表达质粒pET32a-HN,鉴定正确后转化进BL21 plysS(DE3)细胞,筛选出阳性克隆,用1 mmol/L IPTG诱导表达,并对表达产物进行鉴定.SDS-PAGE电泳结果显示,HN基因功能结构域片段在BL21 plysS(DE3)细胞中实现融合表达,表达产物大小约为76 ku,Western blotting试验证实其能与NDV阳性血清反应.本研究为进一步研究HN蛋白功能结构域的免疫原性和研制鸡新城疫HN基因工程疫苗奠定了基础.
本研究對新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)分離株sc05的HN基因進行瞭剋隆、序列測定,在此基礎上將其C耑功能結構域76-571 aa片段亞剋隆到pET32a(+)錶達載體上,構建重組錶達質粒pET32a-HN,鑒定正確後轉化進BL21 plysS(DE3)細胞,篩選齣暘性剋隆,用1 mmol/L IPTG誘導錶達,併對錶達產物進行鑒定.SDS-PAGE電泳結果顯示,HN基因功能結構域片段在BL21 plysS(DE3)細胞中實現融閤錶達,錶達產物大小約為76 ku,Western blotting試驗證實其能與NDV暘性血清反應.本研究為進一步研究HN蛋白功能結構域的免疫原性和研製鷄新城疫HN基因工程疫苗奠定瞭基礎.
본연구대신성역병독(Newcastle disease virus,NDV)분리주sc05적HN기인진행료극륭、서렬측정,재차기출상장기C단공능결구역76-571 aa편단아극륭도pET32a(+)표체재체상,구건중조표체질립pET32a-HN,감정정학후전화진BL21 plysS(DE3)세포,사선출양성극륭,용1 mmol/L IPTG유도표체,병대표체산물진행감정.SDS-PAGE전영결과현시,HN기인공능결구역편단재BL21 plysS(DE3)세포중실현융합표체,표체산물대소약위76 ku,Western blotting시험증실기능여NDV양성혈청반응.본연구위진일보연구HN단백공능결구역적면역원성화연제계신성역HN기인공정역묘전정료기출.
