中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
12期
961-964
,共4页
张萍%刘远佳%李结%李金平%孟祥龙%郭建超%李国清
張萍%劉遠佳%李結%李金平%孟祥龍%郭建超%李國清
장평%류원가%리결%리금평%맹상룡%곽건초%리국청
贾第虫%实时荧光定量PCR
賈第蟲%實時熒光定量PCR
가제충%실시형광정량PCR
为建立贾第虫定性定量的检测方法,本研究针对犬源贾第虫16S rRNA基因片段设计一对引物,将构建的重组质粒作为阳性对照,建立了贾第虫DNA的SYBR Green Ⅰ real-time PCR检测方法.结果显示,特异性产物Tm值为94.20℃,最低可检测到3.39 copy/μL的阳性质粒,标准曲线的相关系数为0.99.与其他常见原虫隐孢子虫、球虫、弓形虫均不发生交叉反应,重复性变异系数小于3％.该检测方法具有较好的特异性和敏感性,为贾第虫病的临床检测和流行病学调查提供了新的技术手段.
為建立賈第蟲定性定量的檢測方法,本研究針對犬源賈第蟲16S rRNA基因片段設計一對引物,將構建的重組質粒作為暘性對照,建立瞭賈第蟲DNA的SYBR Green Ⅰ real-time PCR檢測方法.結果顯示,特異性產物Tm值為94.20℃,最低可檢測到3.39 copy/μL的暘性質粒,標準麯線的相關繫數為0.99.與其他常見原蟲隱孢子蟲、毬蟲、弓形蟲均不髮生交扠反應,重複性變異繫數小于3％.該檢測方法具有較好的特異性和敏感性,為賈第蟲病的臨床檢測和流行病學調查提供瞭新的技術手段.
위건립가제충정성정량적검측방법,본연구침대견원가제충16S rRNA기인편단설계일대인물,장구건적중조질립작위양성대조,건립료가제충DNA적SYBR Green Ⅰ real-time PCR검측방법.결과현시,특이성산물Tm치위94.20℃,최저가검측도3.39 copy/μL적양성질립,표준곡선적상관계수위0.99.여기타상견원충은포자충、구충、궁형충균불발생교차반응,중복성변이계수소우3％.해검측방법구유교호적특이성화민감성,위가제충병적림상검측화류행병학조사제공료신적기술수단.
