新医学
新醫學
신의학
NEW CHINESE MEDICINE
2012年
3期
174-178
,共5页
王庆亮%郭敏毅%李洋%叶小鸣
王慶亮%郭敏毅%李洋%葉小鳴
왕경량%곽민의%리양%협소명
热疗%靶向基因治疗%哺乳动物雷帕霉素靶蛋白%质粒%肝癌
熱療%靶嚮基因治療%哺乳動物雷帕黴素靶蛋白%質粒%肝癌
열료%파향기인치료%포유동물뢰파매소파단백%질립%간암
目的:观察热疗对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)靶向基因治疗在人肝癌细胞SMMC-7721中体外杀伤作用的影响.方法:观察不同温度热疗处理后SMMC-7721的形态学变化,并采用CCK-8试剂检测细胞增殖确定合适热疗温度,以该温度与转染pEGFP-C1-mTOR反义质粒相结合,设置联合组、转染组及对照组,CCK-8试剂检测处理后各组细胞增殖变化;流式细胞仪分析凋亡;逆转录PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印记法检测mTOR基因表达.结果:热疗后细胞皱缩、变圆,胞浆空泡化,坏死细胞比例增加.CCK-8检测示温度越高,热疗对细胞增殖抑制作用越明显,42℃热疗后抑制率达(29.7±1.7)%.联合处理后细胞增殖能力降低,流式细胞仪分析示细胞凋亡比例增加,差异有统计学意义(P＜0.05).转染后mTOR基因表达在mRNA水平和蛋白水平均受到抑制,而联合处理后表达水平进一步下降.结论:热疗可以增强mTOR靶向基因治疗对SMMC-7721细胞的体外杀伤作用.
目的:觀察熱療對哺乳動物雷帕黴素靶蛋白(mTOR)靶嚮基因治療在人肝癌細胞SMMC-7721中體外殺傷作用的影響.方法:觀察不同溫度熱療處理後SMMC-7721的形態學變化,併採用CCK-8試劑檢測細胞增殖確定閤適熱療溫度,以該溫度與轉染pEGFP-C1-mTOR反義質粒相結閤,設置聯閤組、轉染組及對照組,CCK-8試劑檢測處理後各組細胞增殖變化;流式細胞儀分析凋亡;逆轉錄PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印記法檢測mTOR基因錶達.結果:熱療後細胞皺縮、變圓,胞漿空泡化,壞死細胞比例增加.CCK-8檢測示溫度越高,熱療對細胞增殖抑製作用越明顯,42℃熱療後抑製率達(29.7±1.7)%.聯閤處理後細胞增殖能力降低,流式細胞儀分析示細胞凋亡比例增加,差異有統計學意義(P＜0.05).轉染後mTOR基因錶達在mRNA水平和蛋白水平均受到抑製,而聯閤處理後錶達水平進一步下降.結論:熱療可以增彊mTOR靶嚮基因治療對SMMC-7721細胞的體外殺傷作用.
목적:관찰열료대포유동물뢰파매소파단백(mTOR)파향기인치료재인간암세포SMMC-7721중체외살상작용적영향.방법:관찰불동온도열료처리후SMMC-7721적형태학변화,병채용CCK-8시제검측세포증식학정합괄열료온도,이해온도여전염pEGFP-C1-mTOR반의질립상결합,설치연합조、전염조급대조조,CCK-8시제검측처리후각조세포증식변화;류식세포의분석조망;역전록PCR(RT-PCR)화단백면역인기법검측mTOR기인표체.결과:열료후세포추축、변원,포장공포화,배사세포비례증가.CCK-8검측시온도월고,열료대세포증식억제작용월명현,42℃열료후억제솔체(29.7±1.7)%.연합처리후세포증식능력강저,류식세포의분석시세포조망비례증가,차이유통계학의의(P＜0.05).전염후mTOR기인표체재mRNA수평화단백수평균수도억제,이연합처리후표체수평진일보하강.결론:열료가이증강mTOR파향기인치료대SMMC-7721세포적체외살상작용.
