中华骨科杂志
中華骨科雜誌
중화골과잡지
CHINESE JOURNAL OF ORTHOPAEDICS
2007年
12期
920-924
,共5页
王拥军%施杞%周泉%孙鹏%李晨光%周重建%吕维加%梁智仁
王擁軍%施杞%週泉%孫鵬%李晨光%週重建%呂維加%樑智仁
왕옹군%시기%주천%손붕%리신광%주중건%려유가%량지인
软骨细胞%细胞凋亡%胰岛素样生长因子Ⅰ
軟骨細胞%細胞凋亡%胰島素樣生長因子Ⅰ
연골세포%세포조망%이도소양생장인자Ⅰ
目的 建立抗Fas抗体诱导大鼠终板软骨细胞凋亡模型,检测胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)是否有延缓软骨细胞凋亡的作用,并进一步了解软骨细胞中整合素β1和黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)的表达情况.方法 取大鼠颈椎软骨终板软骨细胞行体外培养,应用抗Fas抗体(500 ng/ml)和人重组IGF-1(50 ng/ml)处理.光学显微镜观察细胞形态,透射电子显微镜、TUNEL法观察软骨细胞凋亡形态,免疫细胞化学法检测Bax、Bcl-2表达,实时荧光定量聚合酶链反应、免疫细胞化学和Western blot法检测整合素β1和FAK的基因与蛋白表达.结果 体外培养出软骨细胞并维持其表型.抗Fas抗体诱导软骨细胞发生凋亡,TUNEL染色证明软骨细胞凋亡率升高,透射电镜检查发现典型凋亡小体.与正常组比较,诱导凋亡组Bcl-2表达降低而Bax表达升高,整合素β1和FAK的基因与蛋白表达明显下调;抗Fas抗体与IGF-1联合干预后,Bcl-2表达升高而Bax表达降低,整合素β1和FAK的基因与蛋白表达明显上调.结论 抗Fas抗体可诱导体外培养的终板软骨细胞凋亡,抗Fas抗体与IGF-1联合应用,能延缓软骨细胞凋亡的过程,维持软骨细胞的功能.
目的 建立抗Fas抗體誘導大鼠終闆軟骨細胞凋亡模型,檢測胰島素樣生長因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)是否有延緩軟骨細胞凋亡的作用,併進一步瞭解軟骨細胞中整閤素β1和黏著斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)的錶達情況.方法 取大鼠頸椎軟骨終闆軟骨細胞行體外培養,應用抗Fas抗體(500 ng/ml)和人重組IGF-1(50 ng/ml)處理.光學顯微鏡觀察細胞形態,透射電子顯微鏡、TUNEL法觀察軟骨細胞凋亡形態,免疫細胞化學法檢測Bax、Bcl-2錶達,實時熒光定量聚閤酶鏈反應、免疫細胞化學和Western blot法檢測整閤素β1和FAK的基因與蛋白錶達.結果 體外培養齣軟骨細胞併維持其錶型.抗Fas抗體誘導軟骨細胞髮生凋亡,TUNEL染色證明軟骨細胞凋亡率升高,透射電鏡檢查髮現典型凋亡小體.與正常組比較,誘導凋亡組Bcl-2錶達降低而Bax錶達升高,整閤素β1和FAK的基因與蛋白錶達明顯下調;抗Fas抗體與IGF-1聯閤榦預後,Bcl-2錶達升高而Bax錶達降低,整閤素β1和FAK的基因與蛋白錶達明顯上調.結論 抗Fas抗體可誘導體外培養的終闆軟骨細胞凋亡,抗Fas抗體與IGF-1聯閤應用,能延緩軟骨細胞凋亡的過程,維持軟骨細胞的功能.
목적 건립항Fas항체유도대서종판연골세포조망모형,검측이도소양생장인자-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)시부유연완연골세포조망적작용,병진일보료해연골세포중정합소β1화점착반격매(focal adhesion kinase,FAK)적표체정황.방법 취대서경추연골종판연골세포행체외배양,응용항Fas항체(500 ng/ml)화인중조IGF-1(50 ng/ml)처리.광학현미경관찰세포형태,투사전자현미경、TUNEL법관찰연골세포조망형태,면역세포화학법검측Bax、Bcl-2표체,실시형광정량취합매련반응、면역세포화학화Western blot법검측정합소β1화FAK적기인여단백표체.결과 체외배양출연골세포병유지기표형.항Fas항체유도연골세포발생조망,TUNEL염색증명연골세포조망솔승고,투사전경검사발현전형조망소체.여정상조비교,유도조망조Bcl-2표체강저이Bax표체승고,정합소β1화FAK적기인여단백표체명현하조;항Fas항체여IGF-1연합간예후,Bcl-2표체승고이Bax표체강저,정합소β1화FAK적기인여단백표체명현상조.결론 항Fas항체가유도체외배양적종판연골세포조망,항Fas항체여IGF-1연합응용,능연완연골세포조망적과정,유지연골세포적공능.
